ROS介導的內質網應激在氟致神經干細胞凋亡中的作用.pdf

1、目的：氟引起的發(fā)育神經毒性近年來受到廣泛關注，但其毒作用機制尚未完全闡明。我們前期研究發(fā)現(xiàn)，一定劑量的氟化鈉（NaF）可抑制小鼠源性神經干細胞株C17.2增殖并促進細胞凋亡，同時伴隨著氧化應激和內質網應激的發(fā)生。本研究擬采用緩解內質網應激的化學伴侶4-苯基丁酸（4-PBA）和抗氧化劑N-乙酰半胱氨酸（NAC）對氟染毒進行干預，旨在明確內質網應激在氟致神經干細胞凋亡中的作用及氧化應激所扮演的角色，為進一步闡明氟神經毒性作用機制提供理論依據(jù)

2、。
　　方法：根據(jù)前期研究結果，選取60mg/L NaF對體外培養(yǎng)的C17.2細胞進行染毒處理，采用2mmol/L4-PBA或1mmol/L NAC分別進行干預。染毒24h后，利用Hoechst染色檢測凋亡細胞核形態(tài)改變、western blot檢測凋亡蛋白Caspase-3酶原以及內質網應激相關蛋白GRP78、IRE1和CHOP的表達水平，并采用流式細胞術檢測細胞ROS水平。
　　結果：與60mg/L NaF染毒組相比，4

3、-PBA干預可明顯降低內質網應激相關蛋白IRE1和CHOP的表達水平，并抑制Caspase3酶原剪切活化，減少C17.2細胞凋亡，提示內質網應激信號通路參與氟致C17.2細胞凋亡；此外，與60mg/L NaF染毒組相比，NAC干預不僅使細胞ROS水平顯著降低，還能抑制內質網應激相關蛋白IRE1和CHOP的表達，并減輕其介導的細胞凋亡，表明ROS可能通過內質網應激途徑調控氟誘導的神經干細胞凋亡
　　結論：ROS可作為上游信號分子通過