過(guò)度內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在大鼠慢性環(huán)孢素A腎毒性模型細(xì)胞凋亡中的作用機(jī)制.pdf

1、目的：探討過(guò)度內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在大鼠慢性環(huán)孢素A（Cy-closporine A，CsA）腎毒性模型細(xì)胞凋亡中的作用機(jī)制。
　　方法：將Sprague-Dawley（SD）大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組和慢性CsA腎毒性組，分別給予皮下注射橄欖油（1mL/kg/d，對(duì)照組）和CsA（15mg/kg/d，毒性組）1周及4周后處死大鼠。通過(guò)末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP缺口末端標(biāo)記測(cè)定法（TUNEL染色法）及 Masson染色評(píng)估腎小管間質(zhì)纖維

2、化和細(xì)胞凋亡；使用免疫組化學(xué)染色和免疫印跡依次檢測(cè)分子免疫球蛋白結(jié)合蛋白（Bip）、磷酸化的真核細(xì)胞翻譯起始因子2α（elF2α）、生長(zhǎng)抑制DNA損傷基因153（GADD153）、細(xì)胞凋亡相關(guān)基因caspase-12及caspase-3蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果：與對(duì)照組比較，CsA注射1周觀察不到腎小管間質(zhì)纖維化和TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞，而給予 CsA注射4周大鼠表現(xiàn)為明顯的腎小管間質(zhì)纖維化[(38.9±3.3)％vs.(0.0±0.0)

3、%，P<0.01]和大量 TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞[(89±9)% vs.(7±2)%，P<0.01]。在分子水平上，與對(duì)照組比較，CsA注射組Bip和caspase-12蛋白的表達(dá)1周達(dá)到高峰，4周后降至正常水平；反之，elF2α、GADD153、caspase-3蛋白表達(dá)呈時(shí)間依賴性的增加。
　　結(jié)論：在慢性CsA腎毒性中，過(guò)度的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激耗盡Bip,凋亡前途徑中elF2α、GADD153、caspase-12，caspase-3的