

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文檔簡介
1、第三軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文SOCS3對肺腺癌細(xì)胞株生長和轉(zhuǎn)移的影響及相關(guān)信號通路的研究姓名:余祖濱申請學(xué)位級別:博士專業(yè):外科學(xué)(胸心外)指導(dǎo)教師:肖穎彬20080501第三軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文5、Westernblot法檢測SOCS3對STAT3、Erkl/2、Akt信號分子活性的影響及細(xì)胞周期蛋f芻(cyclinDl、p21)的表達(dá)變化;半定量RTPCR和明膠酶譜分析檢測SOCS3對基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP2、9)表達(dá)和活性的影響。結(jié)果
2、:1、肺腺癌細(xì)胞株A549、SPC—A1在常規(guī)培養(yǎng)條件幾乎檢測不到SOCS3基因表達(dá)。2、轉(zhuǎn)染細(xì)胞經(jīng)G418篩選后獲得SOCS3穩(wěn)定表達(dá)肺腺癌細(xì)胞株;RTPCR和免疫熒光檢測證實(shí)SOCS3基因轉(zhuǎn)染組細(xì)胞中SOCS3mRNA和蛋白水平均有表達(dá)。3、SOCS3穩(wěn)定表達(dá)A549和SPC—A1細(xì)胞克隆形成抑制率分別為738%和559%。SOCS3穩(wěn)定表達(dá)A549細(xì)胞的倍增時(shí)間(64516h)較對照組(49209h)明顯延長(P001)。SPC—
3、A1細(xì)胞也取得了相似的結(jié)果(56915hvs44810h,P001)。4、化療藥物敏感性檢測發(fā)現(xiàn),SOCS3可將A549細(xì)胞對順鉑、阿霉素、紫杉醇的敏感性分別提高31、39、73倍;而SOCS3可將SPC—A1細(xì)胞對順鉑、阿霉素、紫杉醇的敏感性分別提高34、34、64倍。5、與對照組相比,SOCS3穩(wěn)定表達(dá)A549和SPC—A1細(xì)胞移植瘤生長緩慢,瘤重顯著降低(O33_0089VS106_0139inA549;128_0319vJ296
4、_0699inSPC—A1;P001);A549和SPC—A1移植瘤模型的抑瘤率分別為689%和568%。6、細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,SOCS3穩(wěn)定表達(dá)A549細(xì)胞在Matrigel及FN上粘附率(41222%和38846%),較對照組(73581%和66865%)顯著降低(PO01);SOCS3穩(wěn)定表達(dá)SPCA1細(xì)胞在Matrigel及FN上粘附率分別為(37235%和39642%),較對照組(63946%和56453%)顯著降低(PO
5、01)。細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示SOCS3穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞在培養(yǎng)18h穿膜細(xì)胞數(shù)為19321(A549)和23452(SPC—A1),較對照組41735(A549)和47765(SPCA1)顯著減少(PO01)。細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示48h后SOCS3穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞穿膜細(xì)胞數(shù)分別為12325(A549)和14744(SPC—A1),均較對照組23O40(A549)(P005)和34554(SPCA1)(P001)顯著減少。7、在常規(guī)培養(yǎng)條件下,與對
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