NANOG及其假基因在人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞中的表達(dá)情況.pdf

1、臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(Human Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells，hUC-MSCs)具有較強(qiáng)的增殖能力、多向分化潛能、來(lái)源廣泛等特點(diǎn)，因而逐漸成為間充質(zhì)基礎(chǔ)及臨床研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)。在對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特征的研究中，許多研究發(fā)現(xiàn)間充質(zhì)干細(xì)胞中表達(dá)了一些胚胎干細(xì)胞特異的轉(zhuǎn)錄因子，但這些研究結(jié)果容易受到不同轉(zhuǎn)錄剪切體或假基因的干擾而得到假陽(yáng)性的結(jié)果。對(duì)于NANOG表達(dá)情況的研究，就受到了NANOG眾多

2、假基因的干擾。在人基因組中，NANOG基因有11個(gè)假基因，其中一些基因具有一定的轉(zhuǎn)錄活性，有的基因甚至還能編碼蛋白質(zhì)，有的NANOG假基因編碼的蛋白質(zhì)和NANOG基因編碼的蛋白質(zhì)相似度還非常高。本文主要研究探求hUC-MSCs中NANOG及其假基因的表達(dá)情況，并進(jìn)行了如下研究，以便為hUC-MSCs在臨床應(yīng)用的安全性提供依據(jù)。
　　首先，我們采用酶消化的方法，從人的臍帶組織之中分離得到了臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞，經(jīng)過(guò)體外培養(yǎng)后的該類細(xì)胞的

3、增殖能力良好，并且在誘導(dǎo)條件下具有成脂、成骨、成軟骨的多向分化潛能，能夠滿足國(guó)際細(xì)胞治療協(xié)會(huì)提出的對(duì)于人類間充質(zhì)干細(xì)胞表面分子標(biāo)記的要求。
　　然后，我們采用PCR聯(lián)合測(cè)序的方法，研究了hUC-MSCs中NANOG基因及其假基因的表達(dá)情況。通過(guò)對(duì)NANOG基因特異的5'UTR特異擴(kuò)增分析，我們發(fā)現(xiàn)，NANOG基因只在胚胎干細(xì)胞中表達(dá)，在臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞、Hela細(xì)胞、KB細(xì)胞中，都未檢測(cè)到NANOG基因特異的5'