活血開竅湯對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷血—腦屏障及S100β和claudin-5的影響.pdf

1、背景與目的：
　　腦血管病是威脅人類尤其是中老年人健康的常見病、多發(fā)病，具有高發(fā)病率、高病死率、高致殘率和高復(fù)發(fā)率等特點(diǎn)。缺血后繼發(fā)腦損傷是使患者病情加重和影響預(yù)后的重要原因，其損傷機(jī)制比較復(fù)雜，抑制缺血再灌注損傷研究取得的傷是治療腦血管疾病的重要環(huán)節(jié)。今年來(lái)，國(guó)內(nèi)外研究者對(duì)腦缺血再灌注損傷的病理生理機(jī)制的研究取得了一定的進(jìn)展，但是仍缺乏具有針對(duì)性的臨床治療策略[1]。
　　活血開竅湯是由導(dǎo)師李平教授從多年臨床經(jīng)驗(yàn)中得出的治

2、療缺血性腦卒中的有效方劑，由天麻、川芎、葛根、丹參、地龍、牛膝、遠(yuǎn)志、寄生和赤芍組成。通過多年的臨床實(shí)踐證明，此方具有活血開竅、通絡(luò)補(bǔ)腎的作用，在治療腦血管疾病方面具有獨(dú)特的療效。本實(shí)驗(yàn)通過觀察MCAO大鼠腦組織中Claudin-5和血清中S100β的變化，來(lái)探討活血開竅湯對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷保護(hù)作用及其機(jī)制，從而進(jìn)一步為臨床用藥提供實(shí)驗(yàn)理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：
　　本課題選用雄性成年SD大鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，研究活血開竅湯

3、對(duì)局灶性腦缺血再灌注損傷的保護(hù)機(jī)制。我們將大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、活血開竅湯治療組（包括不同時(shí)間點(diǎn)干預(yù)3亞組）。各組在相同環(huán)境下分籠飼養(yǎng)，造模完成后按設(shè)定的時(shí)間點(diǎn)給藥，治療組給予活血開竅湯2.2mg/100mg/d灌胃，假手術(shù)和模型組分別給予等量的生理鹽水灌胃，各組每天灌胃1次，連續(xù)給藥灌胃7天。分別于給藥后6h、24h、72h以及第7d從大鼠眼底靜脈叢采血3ml檢測(cè)血清S100β含量，處死前兩小時(shí)從尾靜脈注射EB溶液以觀察BBB

4、通透性變化，另采取心臟灌注的方法固定大腦，用于免疫組化觀察Claudin-5蛋白含量的變化。
　　結(jié)果:
　　經(jīng)實(shí)驗(yàn)觀察，與對(duì)照組相比，活血開竅湯組Ⅱ組、Ⅲ組大鼠腦缺血側(cè)紋狀體中EB含量和血清中S100β明顯低于模型對(duì)照組(P＜0.05)，而Claudin-5含量相對(duì)較高(P＜0.01)?；钛_竅湯Ⅰ組與模型對(duì)照組相比，差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)?；钛_竅湯Ⅱ組與Ⅲ組相比，差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

5、r>　　結(jié)論:
　　活血開竅湯Ⅱ組和Ⅲ組可以減輕缺血再灌注大鼠BBB對(duì)EB的通透性，降低大鼠大腦紋狀體中EB含量以及血清中S100β的含量，且可以有效保護(hù)腦缺血事件發(fā)生緊密連接蛋白Claudin-5蛋白的破壞從而保護(hù)缺血再灌注大鼠血腦屏障。實(shí)驗(yàn)結(jié)果亦表明，在MCAO后2小時(shí)給藥組大鼠大腦紋狀體中EB含量和血清中S100β含量比24小時(shí)組和48小時(shí)組高，而大腦皮層中Claudin-5陽(yáng)性表達(dá)率偏低。這表明，在急性期給予活血開竅湯治療