細胞免疫和細胞凋亡在口腔扁平苔蘚發(fā)病中的作用與意義.pdf

1、（1）口腔扁平苔蘚(oral lichen planus，OLP)是臨床上最為常見的慢性非感染性口腔黏膜病，是一種發(fā)生在皮膚及黏膜的慢性炎癥性疾病。本研究通過對65例口腔扁平苔蘚患者病變組織進行組織病理學檢查證實其主要病理特征為：上皮過度角化或角化不全，棘層增生多見。上皮形狀不規(guī)則，呈鋸齒狀。基底細胞層液化、變性，導致基底層角質(zhì)細胞排列紊亂，基底膜界限不清，基底層角質(zhì)細胞液化壞死。固有層中有密集的淋巴細胞浸潤帶，該浸潤帶主要分布在固有層

2、的淺層，部分還可深入到固有層的深層或者粘膜下層。本研究65例口腔扁平苔蘚患者中有23例在上皮的棘層、基底層或粘膜固有層可見圓形或卵圓形膠樣小體，為均質(zhì)性、嗜酸性，可能是屬于凋亡的產(chǎn)物。5/65例出現(xiàn)上皮輕度不典型增生，表現(xiàn)為上皮細胞異乎于常態(tài)的增生，具體表現(xiàn)為增生的細胞大小不一，形態(tài)多樣，核大而濃染，核漿比例增大，核分裂可增多但通常呈正常核分裂像。細胞排列較亂，細胞層次增多，極向消失。
　?。?）應用免疫組化S-ABC法檢測CD4

3、+、CD8+T細胞在35例口腔扁平苔蘚組織及10例正?？谇徽衬ぶ械谋磉_水平，結(jié)果表明：正?？谇徽衬ど掀?nèi)幾乎不表達CD4+、CD8+T細胞，僅基底層可見散在的CD4+、CD8+T細胞陽性表達?？谇槐馄教μ\固有層顯示中等量或大量淋巴細胞浸潤，92.3％（60/65）的病例出現(xiàn)淋巴細胞浸潤?？谇槐馄教μ\組與對照組比較CD8+表達水平顯著升高（P<0.01）, CD4+與對照組比較無顯著性差異（P>0.05），表明口腔扁平苔蘚的發(fā)生可能與病變

4、組織中細胞免疫改變有關?？谇槐馄教μ\組CD8+T細胞主要位于固有層淺層，接近基底膜破壞處表達，CD4+T細胞主要于固有層深層表達。CD4/CD8比值下降，與對照組相比差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05)。
　?。?）應用免疫組化S-ABC法檢測Bcl-2和Bax在口腔扁平苔蘚組及對照組中的表達水平。結(jié)果顯示，Bcl-2主要表達于上皮基底層及棘層細胞的胞漿和胞膜，在正常口腔黏膜中，8/10例陽性（+）表達，陽性表達率80%；在口腔扁平苔

5、蘚的上皮組織中，17/35例陰性表達，3/35例在基底層和棘層呈零星散在表達，15/35例淋巴細胞浸潤帶處陽性表達增強，陽性表達率51.4%；Bcl-2在口腔扁平苔蘚中陽性表達率與正?？谇火つけ容^無顯著性變化（P>0.05），但在淋巴細胞浸潤帶處表達增強。35例口腔扁平苔蘚組織中，Bax陽性表達27例，陽性率77.1%，其中14例呈強陽性(+++)表達，9例為中度陽性(++)，4例弱陽性(+)，陽性細胞以基底層和棘層中下部最明顯。10例

6、正常人口腔黏膜中，3例弱陽性(+)表達，其余病例均為陰性(-)，陽性表達率為30.0%。Bax在口腔扁平苔蘚中陽性表達率和表達強度與正?？谇火つけ容^明顯增高（P<0.01）。
　?。?）用 TUNEL法（原位末端轉(zhuǎn)移酶標記法）檢測口腔扁平苔蘚患者病變組織及對照組中細胞凋亡的情況，結(jié)果表明，65例口腔扁平苔蘚病變組織口腔粘膜上皮層及固有層均可見凋亡細胞表達，核輪廓清楚、致密，呈棕褐色?？谇槐馄教μ\病變組織的上皮細胞凋亡指數(shù)明顯較正常

7、對照組高（P<0.01），凋亡細胞多位于基底層液化壞死處，表達率為85.7%（30/35）。而對照組中的凋亡細胞多位于表層、棘層及基底層，表達率為80%（8/10）。
　?。?）雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測外周血血清TNF-a和IFN-γ含量，結(jié)果表明口腔扁平苔蘚患者外周血血清 IFN-γ和 TNF-α含量均顯著高于對照組（P<0.05）。
　?。?）采用單克隆抗體花環(huán)法對T細胞亞群進行識別與測定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與健康組比較，2

8、0例口腔扁平苔蘚患者 CD8+顯著升高（P<0.05），CD4+與對照組比較無顯著性差異（P>0.05），CD4+/CD8+與對照組比較顯著降低（P<0.01），和免疫組織化學染色分析結(jié)果一致。
　?。?）采用透射電鏡技術觀察發(fā)現(xiàn)口腔扁平苔蘚患者口腔黏膜棘層胞質(zhì)內(nèi)充滿張力原纖維，并變粗增多，排列紊亂，內(nèi)織網(wǎng)擴張，內(nèi)含不定形物，線粒體腫大及峭消失，游離核糖體增多。多數(shù)細胞器減少，細胞核團塊狀異染色質(zhì)增多，核周間隙加寬，有的核旁空泡，

9、細胞變形，橋粒結(jié)構(gòu)破壞，細胞間隙明顯擴大?；准毎c基底膜半橋粒及細胞間橋粒破壞，部份細胞變形，排列紊亂，錯位，水腫細胞間隙加大，空泡，變性，胞質(zhì)內(nèi)線粒體腫脹，峭明顯減少，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張。細胞核增大，異染色質(zhì)增多，凋亡細胞增多。凋亡細胞出現(xiàn)頻率高于健康組。凋亡主要表現(xiàn)為染色質(zhì)沿核膜邊聚，且呈“C”形、新月形或團塊狀，并可見凋亡小體。
　　結(jié)論：
　　1．口腔扁平苔蘚的病理組織學特征為基底層角質(zhì)形成細胞的損傷，不同程度的變性、液化

10、壞死，以及固有層T淋巴細胞的帶狀浸潤。
　　2．口腔扁平苔蘚患者病損區(qū)組織固有層及外周血中T淋巴細胞亞群的顯著性改變，表明細胞免疫功能的紊亂在口腔扁平苔蘚發(fā)病中發(fā)揮著重要作用。
　　3．口腔黏膜上皮組織中角質(zhì)形成細胞凋亡及凋亡抑制因子Bcl-2在病損區(qū)淋巴細胞浸潤帶處和凋亡促進因子 Bax在上皮基底層角質(zhì)形成細胞中表達增強，提示細胞凋亡異常與口腔扁平苔蘚的發(fā)生、發(fā)展有重要關系，病損區(qū)組織超微結(jié)構(gòu)觀察結(jié)果也與之相符。