氯化鑭在磨損顆粒誘導無菌性炎癥中作用的體內(nèi)外實驗研究.pdf

1、目的:通過體內(nèi)外實驗觀察不同濃度和劑量的氯化鑭對人工關節(jié)磨損顆粒刺激無菌性炎癥反應的作用效果，為進一步觀察氯化鑭對磨損顆粒導致炎性骨溶解的作用效果及進一步研究其作用機制提供理論依據(jù)。
　　方法:采用真空球磨法體外制備人工關節(jié)磨損顆粒。體外實驗中，RAW264.7細胞被隨機分成8組:空白對照組、磨損顆粒組、磨損顆粒+氯化鑭組(2.5μ mol/L、10μmol/L和100μmol/L)和氯化鑭組(2.5μ mol/L、10μmol/

2、L和100μmol/L);分組處理48h后采用CCK-8、流式細胞術分別進行細胞活性和凋亡檢測，并用ELISA、RT-PCR和western blot檢測TNF-α、IL-1β和NF-κB基因及蛋白的表達水平。體內(nèi)實驗中，采用45只雄性BALB/c小鼠建立氣囊模型，并隨機分為空白對照組、磨損顆粒組和磨損顆粒+氯化鑭組(0.1μmol、0.9μ mol和8.1μmol);分組處理后第7天處死小鼠并收集囊壁組織，通過HE染色觀察囊壁組織中炎

3、癥反應情況，并采用ELISA、RT-PCR和western blot在基因及蛋白水平檢測囊壁組織中TNF-α、IL-1β和NF-κ B的表達變化。
　　結果:分組處理期間，三種濃度和劑量的氯化鑭均未影響RAW264.7細胞的活性和小鼠的存活。磨損顆粒在體內(nèi)外實驗中均可有效刺激無菌性炎癥的產(chǎn)生。體外實驗結果顯示2.5和10μ mol/L氯化鑭可顯著抑制TNF-α、IL-1β以及NF-κB的表達(P＜0.05)，但100μ mol/L

4、氯化鑭未見明顯的炎癥抑制作用，甚至促進炎癥的產(chǎn)生。體內(nèi)實驗結果顯示0.9μmol氯化鑭能抑制小鼠氣囊模型中磨損顆粒誘導的促炎癥因子及NF-κB基因和蛋白的表達(P＜0.05);0.1μmol和8.1μmol氯化鑭未見明顯炎癥抑制效果，8.1μmol氯化鑭甚至產(chǎn)生不良反應。
　　結論:本實驗中氯化鑭未對RAW264.7細胞和BALB/c小鼠產(chǎn)生毒性作用;一定濃度和劑量的氯化鑭可抑制體內(nèi)外磨損顆粒刺激產(chǎn)生的無菌性炎癥，其作用機制可能與