CML急變機制及APL細胞分化相關(guān)組蛋白修飾譜.pdf

1、關(guān)于白血病分子發(fā)病機制研究目前認為有兩類突變或基因重排起重要作用。一類突變或基因重排累及酪氨酸激酶基因，賦予造血前體細胞增殖和/或生存優(yōu)勢；另一類主要累及造血調(diào)控相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子，使造血細胞分化阻滯、凋亡受抑。但迄今為止，多數(shù)白血病的致病基因并不明確，因此在分子遺傳學(xué)和表觀遺傳學(xué)水平繼續(xù)深入研究基因突變和/或表觀修飾的改變對闡述白血病發(fā)病機制及靶向治療具有重要意義。 本實驗室前期在慢性粒細胞性白血病(CML)急變患者中篩選到了造血分

2、化關(guān)鍵調(diào)控因子GATA-2的高頻遺傳學(xué)突變，本文的第一部分工作即以此為出發(fā)點，應(yīng)用帶GFP綠熒光的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體介導(dǎo)的小鼠骨髓移植實驗將GATA-2L359V基因突變引入BCR-ABL基因表達的骨髓造血干/祖細胞中，以此為模型首次在活體內(nèi)研究其在CML急變過程中的作用。我們的研究發(fā)現(xiàn)：1)單轉(zhuǎn)BCR-ABL的小鼠全部發(fā)生致死性的粒系過度增殖；2)GATA-2野生型或L359V與之共表達則能抑制BCR/ABL表達引起的的造血干/祖細胞的過

3、度增殖，導(dǎo)致80-90％的小鼠不再死亡；3)GATA-2L359V突變改變BCR/ABL表達干細胞的粒-單核祖細胞下游分化的命運；4)GATA-2L359V突變干擾單核細胞的分化成熟。 基因突變不可逆，而表觀遺傳修飾是可逆的。這一特點使表觀遺傳修飾成為血液腫瘤治療的新靶標，從而推動新的白血病治療學(xué)的發(fā)展。因此，本文的第二部分工作聚焦在白血病的表觀遺傳修飾譜解讀。我們以全反式維甲酸(All-transretinoicacid，AT

4、RA)誘導(dǎo)急性早幼粒性白血病(APL)細胞分化為模型，結(jié)合2D-Nano-HPLC分離、蛋白質(zhì)譜鑒定及質(zhì)量差異標記等技術(shù)初步建立了組蛋白修飾及其變異的鑒定系統(tǒng)并繪制了APL細胞分化相關(guān)組蛋白修飾譜的草圖。我們的結(jié)果發(fā)現(xiàn)誘導(dǎo)分化過程中異染色質(zhì)凝聚相關(guān)的H4K20三甲基化修飾上調(diào)；基因表達激活相關(guān)的乙?；揎椘毡橄抡{(diào)，可能與分化拮抗基因的轉(zhuǎn)錄抑制相關(guān)；基因表達抑制相關(guān)的H3K9甲基轉(zhuǎn)移酶SUV39H2、SUV39H1和EHMT2和H3K27