CML急變機制及APL細胞分化相關組蛋白修飾譜.pdf

1、關于白血病分子發(fā)病機制研究目前認為有兩類突變或基因重排起重要作用。一類突變或基因重排累及酪氨酸激酶基因，賦予造血前體細胞增殖和/或生存優(yōu)勢；另一類主要累及造血調控相關轉錄因子，使造血細胞分化阻滯、凋亡受抑。但迄今為止，多數白血病的致病基因并不明確，因此在分子遺傳學和表觀遺傳學水平繼續(xù)深入研究基因突變和/或表觀修飾的改變對闡述白血病發(fā)病機制及靶向治療具有重要意義。 本實驗室前期在慢性粒細胞性白血病(CML)急變患者中篩選到了造血分

2、化關鍵調控因子GATA-2的高頻遺傳學突變，本文的第一部分工作即以此為出發(fā)點，應用帶GFP綠熒光的逆轉錄病毒載體介導的小鼠骨髓移植實驗將GATA-2L359V基因突變引入BCR-ABL基因表達的骨髓造血干/祖細胞中，以此為模型首次在活體內研究其在CML急變過程中的作用。我們的研究發(fā)現：1)單轉BCR-ABL的小鼠全部發(fā)生致死性的粒系過度增殖；2)GATA-2野生型或L359V與之共表達則能抑制BCR/ABL表達引起的的造血干/祖細胞的過

3、度增殖，導致80-90％的小鼠不再死亡；3)GATA-2L359V突變改變BCR/ABL表達干細胞的粒-單核祖細胞下游分化的命運；4)GATA-2L359V突變干擾單核細胞的分化成熟。 基因突變不可逆，而表觀遺傳修飾是可逆的。這一特點使表觀遺傳修飾成為血液腫瘤治療的新靶標，從而推動新的白血病治療學的發(fā)展。因此，本文的第二部分工作聚焦在白血病的表觀遺傳修飾譜解讀。我們以全反式維甲酸(All-transretinoicacid，AT

4、RA)誘導急性早幼粒性白血病(APL)細胞分化為模型，結合2D-Nano-HPLC分離、蛋白質譜鑒定及質量差異標記等技術初步建立了組蛋白修飾及其變異的鑒定系統(tǒng)并繪制了APL細胞分化相關組蛋白修飾譜的草圖。我們的結果發(fā)現誘導分化過程中異染色質凝聚相關的H4K20三甲基化修飾上調；基因表達激活相關的乙?；揎椘毡橄抡{，可能與分化拮抗基因的轉錄抑制相關；基因表達抑制相關的H3K9甲基轉移酶SUV39H2、SUV39H1和EHMT2和H3K27