豬瘟分離毒E2基因序列分析和強弱毒檢測方法的探討.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文以豬瘟流行毒自然感染發(fā)病豬的脾臟為材料，提取組織總RNA，根據(jù)已報道的CSFVE2基因序列設(shè)計合成特異性引物，以組織總RNA為模板，利用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)(RT-PCR)測定技術(shù)，對流行于江蘇地區(qū)流行毒株的主要外膜糖蛋白E2基因的核苷酸序列進行了測定，用DNAStar軟件比較分析了5株流行毒之間以及它們與豬瘟兔化弱毒株(C-株)E2基因的核苷酸序列及推導(dǎo)的氨基酸序列的同源性，分析了豬瘟流行毒的變異程度及其與C-株的分子差異，并通過

2、系統(tǒng)進化樹分析，確定其遺傳關(guān)系，從分子生物學(xué)角度研究造成目前豬瘟仍頻繁發(fā)生的可能原因。 在此基礎(chǔ)上，我們對已發(fā)表的強毒株石門株(SM株)、Brescia株、Altort-187株、Esystrup株和弱毒株GPE株、CS株、Riems株和C-株的序列進行酶切位點分析，找到強毒株在282bp處有一個AvaⅠ(BmeT110Ⅰ)酶切位點而弱毒株卻沒有。接著我們用限制性片段長度多態(tài)性分析法(RFLP)對PCR產(chǎn)物進行分析。從本研究結(jié)果

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