早期腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)對(duì)實(shí)驗(yàn)性重癥急性胰腺炎大鼠腸黏膜屏障與肺損傷的影響.pdf

1、目的：探討早期（胰腺炎造模后12小時(shí)）腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)（early enteral nutrition，EEN）對(duì)于實(shí)驗(yàn)性重癥急性胰腺炎大鼠腸黏膜屏障（intestinal mucosal barrier，IMB）及肺損傷的影響。 方法：將48只健康雄性Sprague-Dawley大鼠，體重180-200g，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)對(duì)照組（sham operation group，S組）、腸外營(yíng)養(yǎng)組（parenteral nutrition gro

2、up，PN組）、造模后12小時(shí)行腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)組（early enteral nutrition group，EEN組）和造模后24小時(shí)行腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)組（enteral nutrition group，EN組）。另外取32只健康雄性SD大鼠（體重180-200g），隨機(jī)平均分入上述四組，以觀察5d生存率。采用從胰腺被膜下多點(diǎn)緩慢均勻注入3.8％?；悄懰徕c1ml建立SAP模型，分別于造模后第3、5d兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)采用腹主動(dòng)脈放血法將大鼠分批處死（每次每

3、組6只），收集血標(biāo)本送檢血淀粉酶；部分血清樣本保存于-80℃，以備DAO、TNF-α檢測(cè)，部分血漿樣本保存于-80℃，以備D-乳酸檢測(cè)；同時(shí)將胰腺、回腸、肺組織置于10％中性甲醛溶液中固定，在光鏡下觀察胰腺組織、回腸組織、肺組織的病理學(xué)改變并作病理評(píng)分；回腸組織置于2.5％戊二醛溶液中固定，觀察電鏡下形態(tài)學(xué)改變；免疫組化法檢測(cè)肺組織TNF-α表達(dá)，并觀察早期腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)對(duì)上述各指標(biāo)的影響。 結(jié)果： 1、四組大鼠5d的生存率：

4、S組5d大鼠的生存率是100％，PN、EN、EEN組造模后的生存率分別為50％、62.5％、75％，S組與其余三組的生存率的比較有顯著性差異（P<0.01）；而PN、EN、EEN組之間生存率相比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），說(shuō)明早期腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)是安全的。 2、血清淀粉酶變化：造模后PN、EN、EEN組血淀粉酶水平在各時(shí)間點(diǎn)均顯著升高，與S組比較有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01）；在各時(shí)間點(diǎn)，EEN、EN組與PN組比較，淀粉酶

5、含量雖有降低，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；EEN組與EN組相比，差異也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。 3、胰腺組織學(xué)評(píng)分：①S組評(píng)分低，各時(shí)間點(diǎn)無(wú)明顯變化。②PN、EN、EEN組評(píng)分各時(shí)間點(diǎn)與S組比較有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01）。③與PN組相比，EN、EEN組評(píng)分低，EEN3d組、EN5d組與相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)PN組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05），在5d EEN組與PN組相比有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01）。④在5d EE

6、N組與EN組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）。 4、肺組織形態(tài)學(xué)改變：PN、EN、EEN組第3天可見(jiàn)肺泡隔明顯腫脹、間質(zhì)充血，可見(jiàn)出血，大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，肺實(shí)變明顯，肺大泡形成；第5天仍可見(jiàn)肺泡隔明顯腫脹、間質(zhì)充血，可見(jiàn)出血，大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，肺實(shí)變明顯，肺大泡形成，但較第3天輕；PN組較EN、EEN組稍重，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。EN與EEN組相比無(wú)明顯差別，也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。 5、回腸組織光鏡下

7、形態(tài)學(xué)改變：在第五天時(shí)，PN組腸黏膜厚度、絨毛高度與EEN組相比較，明顯降低，有顯著性差異（P<0.01）；EEN組的腸黏膜厚度及絨毛高度與EN組比較也有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）。 6、回腸組織電鏡下改變：PN組第3天可見(jiàn)微絨毛稀少、排列紊亂，緊密連接增寬；第5天微絨毛稀少、排列紊亂，緊密連接腫脹、破壞。EEN、EN第3天微絨毛稀少、排列紊亂，緊密連接未見(jiàn)異常；EEN、EN第5天可見(jiàn)微絨毛增多，排列整齊，緊密連接未見(jiàn)異常。

8、 7、血清TNF-α水平變化：①S組大鼠血清TNF-α水平較低，在造模后各時(shí)間點(diǎn)無(wú)顯著性變化，且在各時(shí)間點(diǎn)上明顯低于PN、EN、EEN組，差異均有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。②EEN3d組、EN5d組與相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)PN組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05），在5d時(shí)EEN組與PN組相比有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01）。③在5d時(shí)EEN組與EN組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）。 8、血D-乳酸的變化：S組大鼠D-乳酸水平較

9、低，在造模后各時(shí)間點(diǎn)無(wú)顯著性變化，且在各時(shí)間點(diǎn)上明顯低于PN、EN、EEN組，均有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；三組胰腺炎誘導(dǎo)后D-乳酸均增高，在3d、5d時(shí)EEN組的D-乳酸水平較PN組有明顯降低，差別有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；在3d時(shí)EN組較PN組有明顯降低，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；5d時(shí)EN組較PN組也有明顯降低，差別有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；5d時(shí)EEN組的D-乳酸水平較EN組有改善，差別有統(tǒng)計(jì)

10、學(xué)意義（P<0.05）。 9、血DAO的變化：①PN、EN組在3d、5d時(shí)間點(diǎn)上明顯低于S組，差異均有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。②在3d時(shí)EEN組較PN組有升高，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；5d時(shí)EEN組較PN組也有明顯升高，差別有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。③在5d時(shí)EN組的血清二胺氧化酶水平較PN組高，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。④5d后EEN組回升到與S組無(wú)顯著性差別；5d時(shí)EEN組的血清二胺氧化

11、酶水平較EN組高，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。 10、肺組織TNF-α表達(dá)變化：造模后PN、EN、EEN組肺組織TNF-α水平與S組相比，在各時(shí)間點(diǎn)均顯著升高（P<0.01），EN、EEN三組3d、5d與PN組相比均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。 結(jié)論： 1、EEN沒(méi)有加重胰腺炎病情，是安全、可行的，可以在早期應(yīng)用。 2、EEN可以更好保護(hù)腸黏膜屏障。 3、EEN、EN組肺損傷較PN似有減輕