食品中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的毒力研究.pdf

1、單核細(xì)胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes，簡(jiǎn)稱(chēng)單增李斯特氏菌)屬于李斯特氏菌屬(Listeria)，是一種人畜共患的病原菌，可引起人和動(dòng)物的胃腸炎、腦膜炎、敗血癥和流產(chǎn)等，死亡率可達(dá)20～30％。近年來(lái)隨著冷藏和速凍食品消費(fèi)量迅速增多，食品中單增李斯特氏菌的潛在危險(xiǎn)性也越來(lái)越大。單增李斯特氏菌的研究已涵蓋其生物學(xué)特性、檢測(cè)技術(shù)、致病基因、遺傳多樣性等諸多方面。由于不同來(lái)源的單增李斯特氏菌毒力差異較大，有些菌株

2、致病性很強(qiáng)，而有些菌株毒力較弱甚至無(wú)致病性。因此，準(zhǔn)確和快速的鑒別食品分離株的毒力已成為目前國(guó)內(nèi)外學(xué)者研究的熱點(diǎn)之一。
　　 本文采集熟肉制品、豆制品、奶及奶制品、蔬菜、水果、速凍食品、水產(chǎn)品、生肉等8類(lèi)食品共1645份樣品，進(jìn)行單增李斯特氏菌的分離與鑒定。以單增李斯特氏菌相關(guān)毒力基因(hly、plcB、inlA、inlB、inlC、inlJ、prfA)設(shè)計(jì)引物，檢測(cè)49株單增李斯特氏菌食品分離株中的毒力基因攜帶率，并進(jìn)行小鼠毒

3、力實(shí)驗(yàn)，分析毒力基因攜帶率與單增李斯特氏菌毒力的相關(guān)性，建立PCR技術(shù)鑒別單增李斯特氏菌強(qiáng)毒株和弱毒株或無(wú)毒株的方法。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：?jiǎn)卧隼钏固厥暇目倷z出率為3.0％，總檢出率相比其他地區(qū)偏低。在8類(lèi)食品樣品中，生肉中單增李斯特氏菌的檢出率最高，為5.8％，其次是熟肉制品、水產(chǎn)品，檢出率分別為3.3％和2.9％。49株分離株中有19株7種毒力基因檢測(cè)結(jié)果均為陽(yáng)性，7株hly基因陰性，4株plcB基因陰性，4株prfA基因陰性

4、。5株inlA、inlB基因陰性，13株inlC基因陰性，12株inlJ基因陰性，1株inlA、inlB、inlC、inlJ基因均為陰性。4株分離株的毒力與標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC191161E相當(dāng)，小鼠LD50在1.2×108-6.0×108CFU/mL之間，為強(qiáng)毒株。篩選出弱毒株09-132，LD50為1.7×1011CFU/mL。
　　 本研究可得出如下結(jié)論：
　　 1、ALOA顯色培養(yǎng)基無(wú)論是從疑似菌檢出概率還是總的檢出

5、率來(lái)說(shuō)，都是最優(yōu)的；PALCAM平板適于熟肉制品中單增李斯特氏菌檢測(cè)；為提高檢出率最好使用一種以上的選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行分離。
　　 2、生禽蓄肉、水產(chǎn)品、熟肉制品、速凍食品均受到包括單增李斯特氏菌在內(nèi)的兩種及其以上李斯特氏菌的污染，此結(jié)果說(shuō)明某市存在發(fā)生李斯特氏菌食物中毒的潛在危險(xiǎn)。
　　 3、食品分離株的毒力強(qiáng)弱與血清型無(wú)關(guān)。生禽肉中單增李斯特氏菌內(nèi)化素基因(inlA、inlB、inlC，inlJ)陽(yáng)性率高于生畜肉。內(nèi)化