上海市食品中單核細胞增生李斯特菌污染特征與菌膜形成能力的分析.pdf

1、單核細胞增生李斯特菌（Listeria monocytogenes）是一種常見的食源性致病菌，在自然界中普遍存在，可通過食品感染人類，致死率高達20％～30%。在食品生產(chǎn)環(huán)境中，該菌能形成菌膜以抵御消毒劑的傷害，從而增加食品在加工過程中被污染的幾率，帶來食品安全危害。
　　本研究從農(nóng)貿(mào)市場、超市和奶場采集食品樣品，采用國家標準GB4789.30-2010并結合PCR方法，對648份食品進行檢測，發(fā)現(xiàn)40份樣品具有陽性結果，并分離得

2、到86株單增李斯特分離株，總檢出率6.17%。各類食品檢出率由高到低依次為：生肉（15.96%）、速凍食品（9.90%）、熟肉（7.27%）、水產(chǎn)品（4.17%）、生乳（4.16%）、蔬菜（2.02%），乳制品和豆制品中沒有檢出該菌。該結果表明上海市單核細胞增生李斯特菌污染食品的廣泛性，其中生肉、速凍食品污染率較高，熟肉作為即食食品也存在該菌的污染，存在食品安全風險。
　　對分離得到的86株單核細胞增生李斯特菌進行分型研究。采用血

3、清凝集和多重 PCR的方法，將86株分離株分成四個血清型：1/2a（n=62），1/2b（n=17）、1/2c（n=4）和3c（n=3）。致病性較強的血清型1/2a、1/2b占91.9%，說明上海市食品中單核細胞增生李斯特菌存在較高致病風險。采用ERIC-PCR分型方法，將86株菌分成10個類群，對比ERIC-PCR的指紋圖譜與血清分型結果發(fā)現(xiàn)，兩者呈現(xiàn)較高的相關性。ERIC-PCR不僅能區(qū)分單核細胞增生李斯特菌的不同血清型，還能進一步

4、區(qū)分同一血清型中的不同亞型菌株。這些分型結果能為該菌的流行病學調查提供數(shù)據(jù)支持。
　　對所得分離株的菌膜形成能力及其在菌膜狀態(tài)下對消毒劑的抗性進行了研究。通過96孔板結晶紫染色法，測定分離株的菌膜形成能力，不同菌株之間菌膜形成量存在差異（0.37~1.62），發(fā)現(xiàn)1/2b血清型菌株菌膜形成能力較強，冷凍加工能顯著影響菌膜形成能力。比較兩種消毒劑對菌膜的殺滅效果，H2O2消毒劑對菌膜的最低抑制濃度為7500~17500 ppm，Cl

5、O2消毒劑對菌膜的最低抑制濃度為10~30 ppm，前者在國標推薦劑量下無法徹底殺滅菌膜中的單核細胞增生李斯特菌，且隨菌膜形成量的提高，滅菌效果下降；后者表現(xiàn)出較好的滅菌效果，且滅菌能力不受菌膜形成量的影響。
　　綜上所述，本研究對上海市食品中單核細胞增生李斯特菌的分布狀況做了初步描述，并從血清分型及分子分型兩個角度分析了單核細胞增生李斯特菌的污染特征。隨后，測定了分離株的菌膜形成能力及其在菌膜狀態(tài)下對消毒劑的抗性，以上結果為單核