寧夏沙棗花黃酮成分及其抗氧化活性的研究.pdf

1、本文研究了寧夏沙棗花(NX-EAB)中總黃酮的含量測定、提取工藝；并從寧夏沙棗花中分離出5個單體化合物，并鑒定出其中2個單體化合物的結(jié)構(gòu)。對寧夏沙棗花不同提取物和各分離組分及從中分出的單體化合物對1,1-二苯基-2-苦肼基自由基（DPPH·）的清除作用做了研究，并用寧夏沙棗花醇提物（AE-NX-EAB）對四氯化碳(CCl4)誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷的保護作用做了研究。為寧夏沙棗花中總黃酮的應(yīng)用開發(fā)提供了實驗數(shù)據(jù)與基礎(chǔ)，具體內(nèi)容摘要如下：

2、r>　　 1.寧夏沙棗花中總黃酮含量的測定。參照05版藥典，采用紫外-可見分光光度法，以NaNO2-Al(NO3)3-NaOH為顯色體系，蘆丁為對照品測定了寧夏沙棗花中總黃酮的含量，測得用石油醚脫脂后寧夏沙棗花中總黃酮的含量約為2.70％，未用石油醚脫脂的寧夏沙棗花中總黃酮的含量約為1.02％，采用高效液相色譜法分析測定了寧夏沙棗花中蘆丁的含量，發(fā)現(xiàn)寧夏沙棗花中含有蘆丁，含量為0.029 mg/g。
　　 2.寧夏沙棗花中總黃

3、酮提取工藝的研究。首先對寧夏沙棗花總黃酮提取方法進行了研究，確定超聲波提取法為最佳提取方法，通過單因素實驗發(fā)現(xiàn)提取時間，提取次數(shù)，料液比，乙醇濃度對寧夏沙棗花中總黃酮的提取均有顯著影響，且提取溶劑最佳為乙醇；通過L9(34)正交設(shè)計實驗，發(fā)現(xiàn)寧夏沙棗花中總黃酮提取的最佳工藝為A2B2C1D3，即20倍量70％乙醇，超聲波提取1h，提取3次。
　　 3.寧夏沙棗花中單體化合物的分離、純化和鑒定。從沙棗花中分離得到五個單體化合物，純

4、化并鑒定了1種黃酮類化合物BIII：5，7，4′-三羥基黃酮醇-3-O-(6′′-O-E-p-香豆酰基)-β-D-葡萄糖苷；1種糖苷類化合物CcII：苯乙醇-b-D-葡萄糖苷?；衔顱III和CcII在此前與寧夏沙棗花化學(xué)成分相關(guān)的其他文獻中未見報道，均為首次從該植物中分離得到的。
　　 4.寧夏沙棗花清除自由基活性成分的研究。實驗采用紫外-可見分光光度法測定了沙棗花不同提取物對DPPH自由基的清除作用。（1）寧夏沙棗花水煎液（

5、ASE-NX-EAB）及其不同溶劑萃取物均具有清除DPPH自由基的能力。清除能力如下：正丁醇萃取后水液>ASE-NX-EAB>正丁醇萃取物>乙酸乙酯萃取物>石油醚萃取物；（2）沙棗花超臨界CO2總萃取物1（SC-I-NX-EAB）和總萃取物2（SC-II-NX-EAB）及其被不同溶劑萃取的各供試品對DPPH自由基均有不同程度的清除活性，其中SC-I-NX-EAB和SC-II-NX-EAB及其被不同溶劑萃取的萃取物清除能力均具有以下特點：

6、總萃取物>石油醚萃取后水液>正丁醇萃取后水液>乙酸乙酯萃取物≈正丁醇萃取物，且SC-II-NX-EAB清除作用強于SC-I-NX-EAB；（3）從寧夏沙棗花中分出的單體化合物BIII對DPPH自由基也具有清除作用，其IC50為0.209 mg/ml。
　　 5.AE-NX-EAB對四氯化碳(CCl4)誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷的保護作用的研究。本實驗通過可見分光光度法測定小鼠血清中ALT、AST以及肝組織勻漿中的SOD、MDA和GSH

7、的含量，HE染色觀察小鼠肝臟組織的病理變化。結(jié)果顯示AE-NX-EAB給藥組能降低CCl4誘導(dǎo)的急性肝損傷小鼠血清中ALT和AST的水平，與模型組相比，差異具有顯著性（P<0.05），還明顯降低肝組織勻漿中MDA的含量，并提高SOD和GSH的含量，與模型組相比，差異具有顯著性（P<0.05）。病理切片顯示模型組：肝臟體積增大，質(zhì)脆，邊緣鈍而厚，表面呈黃褐色，有暗紅色出血點；鏡下見肝小葉結(jié)構(gòu)破壞，肝細胞核消失，出現(xiàn)以中央靜脈為中心的局灶性