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文檔簡介
1、該0實驗旨在探討馬兜鈴酸(AA)與轉(zhuǎn)化生長因子(TGF-β)在誘導人類腎小管上皮細胞(HKC)轉(zhuǎn)分化中是否存在協(xié)同作用,并探討核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的活化與此種細胞轉(zhuǎn)分化的關(guān)系.方法:該實驗選擇HKC細胞為研究對象.首先通過形態(tài)學、TUNEL方法觀察AA誘導HKC凋亡的作用,并初步確定引起HKC凋亡的AA濃度.然后以相對較低的AA濃度,通過免疫組化、流式細胞儀檢測法以觀察AA、TGF-β單獨及聯(lián)合應(yīng)用誘導轉(zhuǎn)分化的作用.最后選擇可誘導出較強
2、轉(zhuǎn)分化作用的AA和TGF-β濃度,采取激光洪聚焦顯微鏡和蛋白免疫印跡的方法,分別檢測此條例上HKC細胞核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的活性變化,并觀察加入N-酰半胱氨酸(NAC)抑制NF-κB后,HKC轉(zhuǎn)分化現(xiàn)象的變化.結(jié)論:1、一定濃度的AA可以引起體外培養(yǎng)的人腎小管上皮細胞(HKC)凋亡;2、AA(10ug/ml)與TGF-β(10ng/ml)誘導HKC轉(zhuǎn)分化具有顯著的協(xié)同作用;3、核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的活化可能在AA和TGF-β協(xié)同誘導HK
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