STAT3和SOCS3表達對人肝細胞癌惡性演進作用及其機制的研究.pdf

1、本文主要從以下幾個部分展開論述：
　　目的:檢測人肝細胞癌和癌旁非腫瘤病變組織中STAT3、SOCS3、Ki67和VEGF的表達,并觀察STAT3和SOCS3與肝細胞癌臨床病理特征和患者預后的關系,探討STAT3和SOCS3與臨床肝細胞癌發(fā)生和演進的相關性及其臨床意義。
　　方法:構建組織微陣列平臺,應用免疫組織化學S-P法檢測140例肝細胞癌和112例癌旁非腫瘤組織pSTAT3、SOCS3、Ki67和VEGF蛋白的表達,原

2、位分子雜交技術檢測STAT3 mRNA的表達。
　　結果:
　　1.140例肝細胞癌和112例癌旁非腫瘤組織的微陣列樣本中,2例含有過少或不含有腫瘤組織,2例樣本在切片、免疫組化或原位雜交染色過程中脫失,成品率為98.4％。
　　2.肝細胞癌組織中pSTAT3蛋白和STAT3 mRNA表達均較癌旁非腫瘤組織顯著增強(均P<0.001),而肝細胞癌SOCS3蛋白表達較癌旁非腫瘤組織明顯降低(P<0.001)。
　　

3、3.肝細胞癌組織pSTAT3蛋白表達與腫瘤大小、臨床分期,Ki67增殖指數(shù)和VEGF表達均呈顯著正相關(均P<0.01),并且其表達與患者總生存期和無病生存期均呈顯著負相關(均P<0.05);而SOCS3蛋白表達與腫瘤Ki67增殖指數(shù)和VEGF表達均呈顯著負相關(均P<0.01),并且與患者總生存期和無病生存期均呈顯著正相關(均P<0.05)。
　　4.相關性分析顯示,肝細胞癌組織pSTAT3蛋白表達與STAT3 mRNA表達呈顯

4、著正相關(rs=0.726,P<0.001),而與SOCS3蛋白表達呈顯著負相關(rs=-0.606,P<0.001)。
　　結論:STAT3和SOCS3表達的失調可能與肝細胞癌發(fā)生過程有關。pSTAT3表達與肝細胞癌病情演進密切相關,pSTAT3和SOCS3是輔助判斷肝細胞癌患者預后的有效標志物。
　　摘要2
　　目的:觀察瞬時轉染特異性siRNA后分別對人肝癌細胞STAT3和SOCS3的表達,探討STAT3和SOC

5、S3對人肝癌細胞增殖、遷移和侵襲的影響,以及分子機制。
　　方法:以人肝癌細胞系HepG2的為研究對象,使用lipo2000分別瞬時轉染特異性靶向STAT3 siRNA和SOCS3 siRNA,0、24、48、72小時后用MTS法檢測siRNA組和陰性對照組增殖活性;使用“劃痕愈合實驗”分別0、36、72小時檢測不同組別肝癌細胞遷移率;使用“Transwell小室實驗”分別24和36小時檢測不同組別肝癌細胞遷移和侵襲情況。

6、　　結果:
　　1、STAT3的siRNA組與對照組相比細胞增殖活性明顯受到抑制(P<0.01),而SOCS3的siRNA組較對照組的細胞增殖活性顯著增加;
　　2、STAT3的siRNA組“劃痕愈合”較對照組減慢(P<0.01),而SOCS3的siRNA組“劃痕愈合”較對照組加快(P<0.01);
　　3、“Transwell小室”實驗顯示STAT3的siRNA組肝癌細胞遷移和侵襲力較對照組顯著減弱(P<0.01),

7、而SOCS3的siRNA組較對照組遷移和侵襲力顯著增強(P<0.01)。
　　4、STAT3的siRNA組肝癌細胞的MMP-2、MMP-9和c-myc表達較對照組顯著下調,而SOCS3的siRNA組肝癌細胞的相關指標表達較對照組顯著上調。
　　結論:STAT3和SOCS3在肝癌細胞增殖、遷移和侵襲的過程中可能發(fā)揮了重要作用,這種調控作用可能是通過調控MMP-2、MMP-9和c-myc途徑發(fā)揮作用。
　　摘要3
　

8、　目的:通過體內實驗觀察JAK/STAT3信號通路阻斷劑AG490對肝細胞癌裸鼠移植瘤生長、侵襲和轉移等生物學行為的影響,從體內實驗的角度探討阻斷STAT3通路對肝細胞癌生長、侵襲轉移等的抑制作用,以及對相關重要基因的影響。以期對臨床肝細胞癌的治療提供一定的理論依據(jù)。
　　方法:建立人肝癌細胞系HepG2細胞裸鼠異種移植瘤模型并分組。使用AG490、順鉑或生理鹽水處理各組裸鼠。用藥期間連續(xù)測量裸鼠腫瘤體積,檢測腫瘤重量并計算抑瘤率

9、。HE染色檢測腫瘤局部侵襲和肺臟轉移情況。免疫組織化學檢測移植瘤組織中pSTAT3、SOCS3、Ki67、c-myc、MMP-2和MMP-9蛋白表達。
　　結果:
　　1、藥物對裸鼠移植瘤體積生長的影響:分別在用藥后第1天、第4天、第7天及第10天測量腫瘤長徑(a)、短徑(b),計算體積,描繪移植瘤生長曲線圖。結果可見從用藥第7天開始AG490給藥組腫瘤體積顯著小于對照組(P<0.001)。
　　2、藥物對裸鼠移植瘤腫

10、瘤細胞局部侵襲和轉移的生物學的影響:肉眼觀移植瘤呈結節(jié)狀,腫瘤組織血供豐富,給藥組移植瘤境界清楚,無明顯周圍組織和皮膚浸潤,易分離,切面呈魚肉樣。光鏡下觀察給藥組腫瘤細胞較對照組局部侵襲力明顯減弱,肺部轉移率明顯減少。
　　3、免疫組化結果:給藥組移植瘤腫瘤細胞pSTAT3、Ki67、c-myc、MMP-2和MMP-9蛋白表達較對照組明顯降低,而SOCS3表達給藥組明顯高于對照組。
　　結論:AG490能夠通過抑制STAT3