消癌平聯(lián)合奧曲肽對(duì)小鼠肝癌移植瘤生長(zhǎng)抑制作用的研究.pdf

1、目的：
　　 肝細(xì)胞癌(HCC)是常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，它的發(fā)病率和病死率在我國(guó)惡性腫瘤中占前位，同時(shí)嚴(yán)重威脅到人們的健康和生命。在臨床上至今仍缺乏療效較好、副作用較小的治療HCC的藥物。中藥消癌平注射液(XAP)是近年來(lái)常用的抗癌藥物，大量實(shí)驗(yàn)證明它對(duì)HCC有很好的治療效果；奧曲肽(OCT)通過(guò)生長(zhǎng)抑素受體(SSTR)發(fā)揮抗肝癌的作用，近年來(lái)的研究證明其抗癌效果較好，但是關(guān)于XAP聯(lián)合OCT治療HCC的報(bào)道很少。所以本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建

2、立H22肝癌移植瘤小鼠模型，探討不同濃度XAP聯(lián)合OCT對(duì)HCC的體內(nèi)抑瘤效果及其可能的作用機(jī)制。
　　 方法：
　　 建立小鼠皮下移植癌模型后將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為正常組，模型組，XAP低、中、高劑量組(10g/kg·d，20g/kg·d,40g/kg·d),OCT組(100μg/kg)，XAP低、中、高劑量分別聯(lián)合OCT組。每組10只，并開(kāi)始每天腹腔注射給藥，每2天測(cè)一次移植瘤的長(zhǎng)徑和寬徑，計(jì)算各瘤體體積后繪制腫瘤生長(zhǎng)曲

3、線。用藥2周后24小時(shí)，摘眼球放血法處死所有動(dòng)物，剝離瘤體及脾組織，計(jì)算小鼠的腫瘤抑制率和脾指數(shù)；依金氏公式q值評(píng)價(jià)聯(lián)合用藥增效情況；通過(guò)HE染色觀察組織病理形態(tài)變化;采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)血清中Th1(IFN-γ、IL-2)和Th2(IL-4、IL-10)細(xì)胞因子的產(chǎn)生水平；應(yīng)用TUNEL法檢測(cè)各組瘤組織的凋亡情況。應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法(IHC)檢測(cè)各組小鼠移植瘤組織中的凋亡蛋白Bax，Bcl-2的表達(dá)情況。
　

4、　 結(jié)果：
　　 1、XAP中、高劑量組、聯(lián)合用藥組的移植瘤體積和重量明顯小于模型對(duì)照組（P＜0.05），OCT組、XAP低劑量組的移植瘤體積和重量與模型組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，聯(lián)合用藥組的移植瘤體積和重量明顯小于單獨(dú)用藥組和模型對(duì)照組（P＜0.05）；
　　 2、隨著XAP濃度的增加，H22荷瘤的抑制率升高，并呈劑量依賴性關(guān)系；單藥XAP低劑量組、OCT組與模型對(duì)照組相比無(wú)差異(P＞0.05)；單藥O

5、CT對(duì)腫瘤亦有抑制作用。XAP與OCT聯(lián)合用藥組的腫瘤抑制率均高于同等濃度的單藥XAP組和單藥OCT組。XAP低、中、高劑量聯(lián)合OCT的q值分別為：0.9197，1.1233，1.2826，提示XAP+OCT聯(lián)用具有協(xié)同作用，其中以XAP高劑量+OCT組對(duì)H22荷瘤的抑制效果最顯著。
　　 3、脾指數(shù)：XAP各劑量組、OCT組、聯(lián)合用藥組的脾指數(shù)與模型對(duì)照組相比均有一定程度的增加，聯(lián)合用藥組升高脾指數(shù)的作用均高于同等濃度的單藥X

6、AP組和單藥OCT組。
　　 4、HE染色：XAP各劑量組和OCT組較模型組腫瘤壞死范圍均有不同程度的增多，其中OCT組與模型對(duì)照組相比無(wú)差異(P＞0.05)，聯(lián)合用藥組的腫瘤壞死范圍明顯大于模型對(duì)照組。
　　 5、模型組小鼠血清中的IFN-γ、IL-2含量下降，IL-4、IL-10含量升高，呈現(xiàn)Th2型免疫應(yīng)答狀態(tài)，給予藥物作用后聯(lián)合用藥組糾正細(xì)胞因子出現(xiàn)的失衡作用明顯優(yōu)于單獨(dú)用藥組，其中OCT組與模型對(duì)照組相比無(wú)差異

7、(P＞0.05)。
　　 6、各實(shí)驗(yàn)組腫瘤組織的凋亡指數(shù)(AI)均大于模型組，其中聯(lián)合用藥組的AI大于各單獨(dú)用藥組(P＜0.05)，OCT組與模型組的AI相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。同時(shí)各用藥組均能下調(diào)荷瘤小鼠腫瘤組織中凋亡抑制基因Bcl-2的表達(dá)，上調(diào)凋亡促進(jìn)基因Bax的表達(dá)，其中聯(lián)合用藥組的作用最顯著。
　　 結(jié)論：
　　 XAP與OCT均可抑制H22肝癌移植癌的生長(zhǎng)，聯(lián)合用藥組的抑瘤作用優(yōu)于單用X