米諾環(huán)素對腦缺血再灌注模型中ICAM-1的抑制作用及探究其與HMGB-1的關系.pdf

1、目的:觀察米諾環(huán)素在腦缺血再灌注模型中對細胞間黏附分子-1(intercellular adhesion molecule,ICAM-1)和高遷移率族蛋白(highmobility group box-1 protein,HMGB-1)水平的影響及探究HMGB-1及ICAM-1之間的關系。
　　 方法:采用Koizumi's method建議的絲線方法,建立大腦中動脈梗死模型,缺血時間90分鐘后再灌,用3％水合氯醛按體重腹腔內(nèi)注

2、射麻醉。由山西醫(yī)科大勞動衛(wèi)生實驗室提供的健康雄性清潔SD大鼠80只,體重250±50g,按完全隨機方法分成四組分別是假手術組,模型組,米諾環(huán)素治療組1(10mg/kg)和米諾環(huán)素治療組2(15mg/kg)。在再灌后12小時開始用藥,每日一次,持續(xù)用7天。每組在術后1、3、5、7天分別處死5只,將損傷側腦組織均漿稀釋后進行檢測。為了消除總蛋白因素的影響,我們先用考馬斯亮藍法測定總蛋白濃度,然后分別用ELISA酶聯(lián)免疫分析法進行ICAM-1

3、和HMGB-1的測定(試劑盒為Sigma公司提供),將各自值比上總蛋白濃度得到其所占比例,我們將分析比較這一比值的變化。運用SPSS17.0統(tǒng)計軟件統(tǒng)計結果描述用均數(shù)及標準差表示,多組比較符合方差齊性者用方差分析,否則用K-W秩和檢驗,兩組比較當正態(tài)性及方差齊性時用t檢驗,符合正態(tài)性但方差不齊時用矯正后的t檢驗。探究HMGB-1和ICAM-1兩者關系應先繪制散點圖,然后視其為線性或者非線形關系來決定分析方法。
　　 結果:模型組

4、與假手術組之間的ICAM-1和HMGB-1差異是有統(tǒng)計學意義的(P＜0.05)。7天中模型組米諾環(huán)素組1米諾環(huán)素組2各組總體ICAM-1的統(tǒng)計學描述為,模型組3.430±0.766,米諾環(huán)素1組是2.813±0.272,米諾環(huán)素2組為2.587±0.251。米諾環(huán)素在術后7天總體上能減少腦缺血再灌注損傷后ICAM-1的表達,且在這次實驗中該抑制作用符合劑量依賴的正向關系(經(jīng)過levene法檢驗為方差不齊,選用K-W秩檢驗,總體比較比較P

5、值都小于0.05),推斷這3組總體之間差異是有統(tǒng)計學意義的。進而選用Bonferroni法進行組間比較(a'取0.0167),得出各組間差異均具有統(tǒng)計學意義(P值小于0.0167),說明米諾環(huán)素對腦缺血再灌注損傷后ICAM-1的表達有抑制的作用,且在這次實驗中這種作用與米諾環(huán)素劑量呈正相關系(Z0.1658=2.13,a'=0.0167,Z23=2.390,Z24=4.472,Z34=2.155,各組間比較P值均小于a')。7天中總體能

6、減少腦缺血再灌注損傷后HMGB-1的表達,各組分布近似正態(tài)分布,統(tǒng)計學描述為模型組27.552±2.297,米諾環(huán)素1組23.909±2.893,米諾環(huán)素2組21.832±2.593。方差齊性檢驗P為0.525＞0.10,方差分析結果P＜0.001,各組間比較LSD法各組P值均小于0.05。在第7天時對ICAM-1的抑制作用研究時資料提示各組數(shù)據(jù)方差齊(P值大于0.10),組間比較提示各組間比較P值＜0.001,提示各組間差異有統(tǒng)計學意

7、義,可以認為劑量不同時,可以產(chǎn)生對ICAM-1不同的影響,且結合統(tǒng)計描述容易得知,這種抑制是呈劑量依賴正相關的。在第7天時米諾環(huán)素對HMGB-1的抑制作用資料提示,各組間的差異是有統(tǒng)計學意義的(P值小于0.05)。在模型組和米諾環(huán)素處理組1中,術后第3天時HMGB-1和ICAM-1的回歸關系在檢驗水準是0.10的情況下是有統(tǒng)計學意義的,兩者較符合二次方和三次方的關系,方程為米諾環(huán)素1組Y=-0.096X2+4.474X-49.274,模

8、型組y=-0.026X2+1.414X-15.473,按a=0.10的檢驗水準,P＜0.10,回歸方程是有意義的。
　　 結論:這次研究表明米諾環(huán)素可以抑制腦缺血再灌注損傷后ICAM-1的表達,在術后第7天米諾環(huán)素對腦缺血再灌注損傷后ICAM-1的表達有抑制作用。米諾環(huán)素素還可以抑制同過程中HMGB-1的表達。上述抑制作用在這個實驗中均與米諾環(huán)素劑量呈正向變化關系。其中,在損傷后第3天的模型組和米諾環(huán)素處理1組中,HMGB-1與