2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、葡激酶(staphylokinase,SAK)是由金黃色葡萄球菌(staphyloccusaureus)分泌的一種含136個(gè)氨基酸殘基的胞外蛋白質(zhì)。采用PCR方法,從金黃色葡萄球菌中獲得了葡激酶(staphylokinase,SAK)基因,利用T/A克隆將SAK基因轉(zhuǎn)入到pUCm-TVector中。用限制性酶Not I和Bam HI雙酶切綠色熒光蛋白真核載體pEGFP-NI和含有SAK基因的pUCm-T Vector,分別得到線型pEG

2、FP-NI基因和SAK基因,并且其都具有Not I和BamH I限制性酶酶切末端。用T4連接酶連接著兩個(gè)線型基因,重新構(gòu)建了SAK基因真核載體,并轉(zhuǎn)化JM 109細(xì)胞,篩選陽(yáng)性克隆。把重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化Hela細(xì)胞,對(duì)轉(zhuǎn)化后的細(xì)胞經(jīng)超聲破碎,離心上清和沉淀物進(jìn)行SDS-PAGE和Western blot。 發(fā)現(xiàn)重組質(zhì)粒在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)了葡激酶蛋白,并且SAK蛋白主要是以可溶狀態(tài)存在于細(xì)胞內(nèi)。 用熱血漿瓊脂糖檢測(cè)重組質(zhì)粒表達(dá)的SAK

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