心肌方向誘導(dǎo)分化和富集對(duì)胚胎干細(xì)胞在心肌缺血部位移植后致腫瘤能力的影響.pdf

1、目的：胚胎干細(xì)胞移植可以改善受損心臟的生物學(xué)功能，已經(jīng)得到廣泛的認(rèn)可，但胚胎干細(xì)胞移植后，畸胎瘤的形成嚴(yán)重阻礙了其從實(shí)驗(yàn)研究到臨床應(yīng)用的轉(zhuǎn)變。為了進(jìn)一步研究處于不同階段的胚胎干細(xì)胞在移植后的致腫瘤能力，本研究探討了心肌方向分化及富集對(duì)胚胎干細(xì)胞移植后致腫瘤能力的影響。 方法：D3譜系的胚胎干細(xì)胞應(yīng)用抗壞血酸誘導(dǎo)向心肌細(xì)胞方向分化，用percoll密度梯度離心的方法對(duì)心肌細(xì)胞進(jìn)行富集。應(yīng)用RT-PCR的方法檢測(cè)胚胎干細(xì)胞經(jīng)過心肌方

2、向誘導(dǎo)分化和富集而獲得的種子細(xì)胞中胚胎干細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子OCT-4的表達(dá)。將胚胎干細(xì)胞、胚胎干細(xì)胞來源的心肌細(xì)胞及percoll富集后的胚胎干細(xì)胞來源的心肌細(xì)胞分別移植到免疫抑制的健康大鼠的心肌缺血部位，5×106細(xì)胞/只，15只大鼠/組。移植后的第八周，獲取心臟，從心肌分化和富集兩個(gè)方面，根據(jù)腫瘤的發(fā)生率和體積進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，比較畸胎瘤的發(fā)生情況。 結(jié)果：胚胎干細(xì)胞來源的心肌細(xì)胞中后仍有多潛能的胚胎干細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子OCT-4的表達(dá)，