人卵母細(xì)胞第一極體活檢及熒光原位雜交對非整倍體診斷的研究.pdf

1、目的:利用細(xì)胞松弛素B(CB)對小鼠卵母細(xì)胞預(yù)處理，建立鼠卵單精子卵胞漿內(nèi)注射(ICSI)并第一極體活檢的模型。研究活檢極體對卵母細(xì)胞受精及胚胎發(fā)育的影響，為人卵母細(xì)胞第一極體活檢做理論和技術(shù)準(zhǔn)備。 方法:以昆明品系性成熟小鼠為實驗材料，設(shè)定活檢組和對照組。再按是否予CB對鼠卵預(yù)處理，分為CB組和無CB組。將獲取的成熟卵母細(xì)胞行ICSL活檢組采用激光切割透明帶活檢出第一極體，培養(yǎng)小鼠胚胎至囊胚期。對照組在ICSI術(shù)后直接培養(yǎng)至囊

2、胚期。觀察并比較兩組的受精率、卵裂率和囊胚形成率。 結(jié)果:激光法活檢小鼠卵母細(xì)胞第一極體成功率90％。無CB預(yù)處理時，小鼠卵母細(xì)胞死亡率高。存活的鼠卵中，第一極體活檢組和對照組之間受精率、卵裂率、桑椹胚及囊胚形成率無統(tǒng)計學(xué)差別(P>0.05)。CB處理時，小鼠卵母細(xì)胞死亡減低。存活的鼠卵中，第一極體活檢組和對照組之間受精率、卵裂率、桑椹胚及囊胚形成率亦無統(tǒng)計學(xué)差別(P>0.05)。CB處理后小鼠卵母細(xì)胞ICSI后的存活率顯著提高

3、(P<0.01)，存活鼠卵受精率增高，具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。 結(jié)論:1.本實驗建立了小鼠卵母細(xì)胞第一極體活檢的模型，并且發(fā)現(xiàn)利用細(xì)胞松弛素B預(yù)處理更利于此動物模型的建立； 2.激光打孔活檢小鼠第一極體安全有效； 3.小鼠第一極體的活檢對卵母細(xì)胞的受精及胚胎后續(xù)發(fā)育無不良影響。 方法:利用廢棄的卵母細(xì)胞行ICSI術(shù)，后行激光切割透明帶法活檢第一極體，觀察活檢后卵母細(xì)胞受精及胚胎后續(xù)發(fā)育情況。同時，和僅行

4、ICSI組的對照組比較，觀察兩組雙原核率、卵裂率及囊胚形成率有無差別。按形態(tài)對第一極體進行分級，比較不同形態(tài)的極體活檢對胚胎后續(xù)發(fā)育的影響。 結(jié)果:激光打孔法活檢人卵母細(xì)胞第一極體成功率95.3％?；顧z組和對照組在兩原核(2PN)形成率、卵裂率及囊胚形成率上均無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。不同形態(tài)第一極體的卵母細(xì)胞2PN形成率、卵裂率無差別(P>0.05)，囊胚形成率有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)?；顧z組和對照組對應(yīng)形態(tài)級別第一極