JWA調節(jié)MNNG誘導的HBE細胞凋亡和惡性轉化.pdf

1、本課題組近年來先后證實JWA基因較廣泛地參與多種化學藥物(如ATRA，TPA，Ara-C，As2O3和hemin)誘導的白血病原代細胞和細胞株的分化、成熟和凋亡調節(jié)，可能細胞內調節(jié)分化多種信號通路的共同信號分子。還有實驗證據顯示，JWA是新的活躍的環(huán)境應答基因，積極參與細胞應答環(huán)境熱應激、氧化應激等導致的DNA損傷與修復過程。 細胞惡性轉化是細胞分化成熟的逆過程，JwA基因參與調節(jié)多種白血病腫瘤細胞的分化成熟過程，是否與細胞的惡

2、性轉化過程有關呢?本課題選用經典的烷化劑甲基硝基亞硝基胍(MNNG)，一種環(huán)境中廣泛存在并且已經被確認的強化學致癌物，MNNG可導致接觸細胞產生嚴重的DNA損傷，已經被常用作動物誘癌模型和細胞惡性轉化模型。本研究中我們建立了MNNG誘導人支氣管上皮(HBE)細胞凋亡和細胞惡性轉化的實驗模型，并在此基礎上研究在細胞凋亡和惡性轉化過程中JWA基因的作用。 1.MNNG誘導HBE細胞發(fā)生凋亡用1、2、4、8和16μg/mlMNNG處理

3、后觀察HBE細胞24h，其生長抑制率分別為1.4﹪、8.3﹪、32.2﹪、50.3﹪、92.7﹪。 2.MNNG誘導人支氣管上皮細胞發(fā)生惡性轉化為進一步探討JWA是否參與調節(jié)MNNG誘導細胞惡性轉化過程，本研究首先構建JWA高表達、JWA反義表達和相應的載體對照，并用這些表達或對照載體轉染HBE細胞后再用G418穩(wěn)定篩選相應的HBE細胞株。 3.JWA應答MNNG引起HBE細胞凋亡和惡性轉化的結構基礎為了解JWA基因是否