HBVX基因誘導肝卵圓細胞惡性轉(zhuǎn)化.pdf

1、目的：研究HBx基因?qū)Ω温褕A細胞轉(zhuǎn)分化的影響，為HBx基因誘導卵圓細胞轉(zhuǎn)分化成肝癌細胞的機制提供初步理論依據(jù)。
　　 方法：以穩(wěn)定表達HBx的轉(zhuǎn)基因卵圓細胞株pEGFP-HBx卵圓細胞為實驗組，pEGFP卵圓細胞及LE/6卵圓細胞為對照組，運用透射電鏡、流式細胞術(shù)、PAS染色、集落形成試驗、Realtime-PCR、免疫細胞化學檢測pEGFP-HBx卵圓細胞在細胞形態(tài)、細胞周期、分化標志物、癌基因c-myc及TGF-ɑ表達變化。

2、
　　 結(jié)果：(1）pEGFP-HBx卵圓細胞體積增大，核具有明顯異形性；(2)流式細胞儀檢測顯示與對照組相比，pEGFP-HBx卵圓細胞G0/G1期細胞百分比下降，S期和G2/M期細胞百分比明顯升高，而且非整倍體細胞明顯增多；（3）PAS染色顯示pEGFP-HBx卵圓細胞胞漿內(nèi)可見大量糖原顆粒；（4）軟瓊脂中可見pEGFP-HBx卵圓細胞克隆集落形成；（5）癌基因c-myc及TGF-ɑ表達量明顯增高，卵圓細胞分化指標HNF-4