大豆異黃酮誘導(dǎo)小鼠先天性尿道下裂模型的建立及發(fā)病機制的初步探討.pdf

1、本研究分為三部分： 第一部分：大豆異黃酮致小鼠尿道下裂動物模型的建立 目的：應(yīng)用大豆異黃酮孕晚期染毒誘導(dǎo)子代雄鼠尿道下裂的建立,為雌激素致尿道下裂的分子作用機制提供進一步研究的基礎(chǔ)。 方法：45只孕鼠隨機分成5組,在孕12-17d連續(xù)6d各組每晨9點分別灌胃生理鹽水0.2ml/d(A)、己烯雌酚0.5 mg/(kg.d)(B)、大豆異黃酮100 mg/(kg.d)(C)、300 mg/(kg.d)(D)、900

2、mg/(kg.d)(E),出生時觀察小鼠死亡率,出生后4周觀察小鼠有無尿道下裂。 結(jié)果:A,B,C,D,E各組平均死亡率分別為2.0％,18％,3.8％,5.4％,10％。A,B,C,D,E組子代尿道下裂發(fā)生率分別為0％(0/80),28％(11/39),0％(0/76),0％(0/67),19％(10/52)。E組子代尿道下裂發(fā)生率與A,C,D組比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。E組子代尿道下裂發(fā)生率與B組比較無統(tǒng)計學(xué)差異。

3、 結(jié)論：應(yīng)用昆明種小鼠從孕12d開始給予大豆異黃酮900 mg/(kg.d)灌胃,連續(xù)給藥6d,成功建立小鼠先天性尿道下裂模型。 第二部分：先天性尿道下裂小鼠血清睪酮和雌二醇含量的測定 目的：測定小鼠血清睪酮和雌二醇的含量,初步探討大豆異黃酮致雄性仔鼠尿道下裂的發(fā)生機制。 方法：隨機選取空白對照組雄性仔鼠10只(F),從大豆異黃酮低(G)、中劑量組(H)各選取非尿道下裂雄性仔鼠10只,從大豆異黃酮高劑量組選

4、取先天性尿道下裂雄性仔鼠10只(I),分別采血用放射免疫分析法測定睪酮(T)和雌二醇(E2),各組之間進行比較。 結(jié)果:F,G,H,I,4組體內(nèi)睪酮含量比較有顯著統(tǒng)計學(xué)差異性(P<0.05),而雌二醇含量無明顯統(tǒng)計學(xué)差異性(P>0.05)。 結(jié)論：先天性尿道下裂仔鼠與正常對照組比較,體內(nèi)睪酮含量比較有顯著統(tǒng)計學(xué)差異性,而雌二醇含量無明顯統(tǒng)計學(xué)差異性。 第三部：分先天性尿道下裂小鼠陰莖皮膚及睪丸組織中AR的測定

5、 目的：研究大豆異黃酮對雄性仔鼠尿道下裂的發(fā)生并進一步檢測仔鼠陰莖皮膚和睪丸組織中雄激素受體(AR)的表達,初步探討其發(fā)病機制。 方法：隨機選取正常對照組雄性仔鼠(J),造模組非尿道下裂仔鼠(K),先天性尿道下裂仔鼠各10只(L),分別取其陰莖皮膚和睪丸組織用免疫組織化學(xué)法測定AR的含量。 結(jié)果:L組陰莖皮膚組織中AR含量明顯低于J組和K組(P<0.05),J組和L組間陰莖皮膚組織中AR含量無明顯差異(P>0.05)