唾液酸轉(zhuǎn)移酶ST8Sia VI在乳腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移過(guò)程中的作用及其分子機(jī)制的初步研究.pdf

1、腫瘤的發(fā)生、發(fā)展以及轉(zhuǎn)移與糖鏈的表達(dá)密切相關(guān),腫瘤細(xì)胞表面唾液酸化糖鏈的結(jié)構(gòu)和數(shù)量的變化會(huì)引起腫瘤細(xì)胞運(yùn)動(dòng)黏附、遷移侵襲、增殖凋亡等多種功能的改變。唾液酸化的糖鏈?zhǔn)怯梢环N或多種唾液酸轉(zhuǎn)移酶催化合成的,α2,8-唾液酸轉(zhuǎn)移酶Ⅵ(ST8SSia Ⅵ)是鼠的唾液酸轉(zhuǎn)移酶家族20個(gè)成員之一,是第一個(gè)被報(bào)道的催化O-聚糖唾液酸化的α2,8-唾液酸轉(zhuǎn)移酶。ST8Sia Ⅵ對(duì)糖蛋白和糖鞘脂的糖基非還原末端的NeuAcα2,3(6)Gal序列有催化活性

2、,該酶催化底物形成NeuAcα2,8NeuAc的二聚唾液酸化結(jié)構(gòu)。2005年人的STSSia Ⅵ糖基轉(zhuǎn)移酶也被克隆出來(lái),但是關(guān)于STSSia Ⅵ功能的研究很少,其在細(xì)胞的生理和病理過(guò)程中的作用國(guó)內(nèi)外均無(wú)相關(guān)報(bào)道。本文旨在研究STSSia Ⅵ在乳腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移過(guò)程中的作用,并探討其作用機(jī)制,為闡明細(xì)胞膜上糖蛋白的二聚唾液酸化在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展過(guò)程中的重要作用提供理論依據(jù),同時(shí)為腫瘤的診斷和治療開(kāi)辟新途徑。
　　 本實(shí)驗(yàn)以小鼠乳腺癌細(xì)

3、胞4T1和67NR為研究對(duì)象。首先,構(gòu)建了穩(wěn)定的ST8Sia Ⅵ過(guò)表達(dá)的4T1和67NR細(xì)胞株,在體外探討了ST8Sia Ⅵ對(duì)腫瘤細(xì)胞行為學(xué)方面的影響。MTT法實(shí)驗(yàn)表明,STSSia Ⅵ對(duì)4T1和67NR細(xì)胞的生長(zhǎng)無(wú)影響;Transwell小室實(shí)驗(yàn)證明STSSia Ⅵ明顯促進(jìn)4T1和67NR細(xì)胞的遷移能力。這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明STSSia Ⅵ的過(guò)表達(dá)能夠提高小鼠乳腺癌細(xì)胞的惡性程度,對(duì)于4T1細(xì)胞尤其作用尤其顯著。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)ST8Sia

4、Ⅵ在乳腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移過(guò)程中發(fā)揮重要作用。
　　 在4T1細(xì)胞中尋找STSSia Ⅵ促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移相關(guān)靶蛋白或信號(hào)通路,發(fā)現(xiàn)ST8Sia Ⅵ過(guò)表達(dá)對(duì)MAPK通路的激活尤為顯著。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞因子IL-6可以部分通過(guò)gp130-JAK通路來(lái)激活MAPK通路,但是gp130受體和IL-6R受體不是ST8Sia Ⅵ的靶蛋白。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)發(fā)現(xiàn)MAPK通路在ST8Sia Ⅵ促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移中起關(guān)鍵作用,當(dāng)抑制MAPK的活性后,ST8Sia Ⅵ

5、增強(qiáng)乳腺癌細(xì)胞遷移能的作用消失,表明4T1中ST8Sia Ⅵ是通過(guò)MAPK信號(hào)通路依賴(lài)的機(jī)制來(lái)影響細(xì)胞的遷移能力,其中ST8Sia Ⅵ的糖基化修飾靶蛋白需要進(jìn)一步研究。
　　 綜上所述,唾液酸轉(zhuǎn)移酶ST8Sia Ⅵ能夠促進(jìn)小鼠乳腺癌細(xì)胞的遷移能力,初步實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,ST8Sia Ⅵ主要通過(guò)激活MAPK信號(hào)通路促進(jìn)乳腺癌4T1細(xì)胞轉(zhuǎn)移,IL-6和gp130信號(hào)通路在其中起到重要作用,但不是ST8Sia Ⅵ的修飾靶蛋白,靶蛋白有待進(jìn)