雙側(cè)肺門(mén)迷走神經(jīng)切斷術(shù)治療支氣管哮喘的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景:支氣管哮喘是全球性的嚴(yán)重健康難題，全世界絕大部分國(guó)家的各年齡層的人群均可受到該疾病的不同程度的困擾。病因還不明確，與多基因遺傳有關(guān)，同時(shí)受遺傳因素和環(huán)境因素的雙重影響。哮喘的發(fā)病機(jī)制也不完全清楚，變態(tài)反應(yīng)、氣道炎癥、氣道高反應(yīng)性、神經(jīng)等因素及其相互作用與哮喘的發(fā)病關(guān)系密切。臨床上以?xún)?nèi)科保守治療為主的治療手段不能完全控制哮喘的發(fā)作或徹底的治愈。近年來(lái)的大量研究證明哮喘發(fā)病與支配氣道的植物神經(jīng)失衡密切相關(guān)，其中迷走神經(jīng)最為關(guān)鍵。刺激迷

2、走神經(jīng)引起支氣管收縮，這在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中已經(jīng)得到證明，臨床上也觀察到切斷肺門(mén)迷走神經(jīng)可使哮喘病人的癥狀得到明顯緩解。但其治療機(jī)制尚未明了，缺乏可靠的理論基礎(chǔ)與實(shí)驗(yàn)研究。我們?cè)谇捌谘芯恐谐晒⒘斯返南Ｐ?，并通過(guò)手術(shù)實(shí)施雙側(cè)肺門(mén)迷走神經(jīng)切斷術(shù)，證實(shí)了該手術(shù)治療方法的可行性及有效性。本實(shí)驗(yàn)在建立確切的動(dòng)物模型基礎(chǔ)之上，通過(guò)再次建立和印證該模型，并通過(guò)放免法測(cè)定系列與哮喘發(fā)作關(guān)系密切的神經(jīng)肽、免疫介質(zhì)、炎癥細(xì)胞因子等指標(biāo)，從神經(jīng)、免疫、炎癥的

3、分子水平研究雙側(cè)肺門(mén)迷走神經(jīng)切斷術(shù)治療哮喘的有效性機(jī)制。同時(shí)在預(yù)實(shí)驗(yàn)手術(shù)基礎(chǔ)之上，將肺門(mén)迷走神經(jīng)切斷術(shù)再分成完全切斷及不完全切斷兩種術(shù)式，以期探討肺門(mén)迷走神經(jīng)切斷的范圍與手術(shù)有效性、術(shù)后并發(fā)癥的關(guān)系。 目的:從神經(jīng)、免疫、炎癥的分子水平研究哮喘發(fā)作與迷走神經(jīng)的相關(guān)性機(jī)制及肺門(mén)迷走神經(jīng)切斷術(shù)治療哮喘的有效性機(jī)制。2.探討肺門(mén)迷走神經(jīng)切斷的范圍與手術(shù)有效性之間的關(guān)系。 方法:首先對(duì)備選狗行豬蛔蟲(chóng)抗原皮試，皮試陽(yáng)性狗隨機(jī)分為三

4、組：A組(雙側(cè)開(kāi)胸+雙側(cè)肺門(mén)迷走神經(jīng)完全切斷術(shù))、B組(雙側(cè)開(kāi)胸術(shù))、C組(雙側(cè)開(kāi)胸+雙側(cè)肺門(mén)迷走神經(jīng)不完全切斷術(shù))，每組5只。采用經(jīng)氣管插管給予豬蛔蟲(chóng)抗原霧化吸入的方法，建立狗哮喘模型。抗原激發(fā)后2天，A組行雙側(cè)開(kāi)胸+雙側(cè)肺門(mén)迷走神經(jīng)完全切斷術(shù)(即切斷肺門(mén)迷走神經(jīng)前分支和后分支)；B組行雙側(cè)開(kāi)胸術(shù)，不予切斷肺門(mén)迷走神經(jīng)；C組行雙側(cè)開(kāi)胸+雙側(cè)肺門(mén)迷走神經(jīng)不完全切斷術(shù)(即切斷肺門(mén)迷走神經(jīng)后分支，保留肺門(mén)迷走神經(jīng)前分支)。術(shù)后第5天，再次給

5、予經(jīng)氣管插管豬蛔蟲(chóng)抗原霧化吸入激發(fā)，比較分析兩次激發(fā)三組組間的差異及各組激發(fā)前后的差異。 檢測(cè)指標(biāo)包括激發(fā)前5分鐘、激發(fā)后5分鐘、激發(fā)后30分鐘狗的呼吸頻率(RR)、氣道壓峰值(Ppeak)、潮氣量(TV)、肺動(dòng)態(tài)順應(yīng)性(Cdyn)、心率(HR)、平均動(dòng)脈壓(MAP)；激發(fā)前5分鐘、激發(fā)后5分鐘動(dòng)脈血氧分壓(PaO2)、動(dòng)脈血二氧化碳分壓(PaCO2)；激發(fā)前5分鐘、激發(fā)后5分鐘、激發(fā)后30分鐘血漿/清P物質(zhì)(SP)、一氧化氮(

6、NO)、環(huán)腺苷酸(CAMP)、環(huán)鳥(niǎo)苷酸(CGMP)、免疫球蛋白E(IgE)、白細(xì)胞介素—4(IL-4)、降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)等指標(biāo)。 本研究采用的評(píng)價(jià)指標(biāo)為連續(xù)型變量，總體符合正態(tài)分布。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)上采用三組隨機(jī)對(duì)照的方法，數(shù)據(jù)以統(tǒng)計(jì)軟件SPSS11處理。三組之間各評(píng)價(jià)指標(biāo)激發(fā)后變化值的比較用單因素方差分析；每組樣本激發(fā)前后各評(píng)價(jià)指標(biāo)差別的顯著性檢驗(yàn)用配對(duì)t檢驗(yàn)。凡涉及均數(shù)結(jié)果以X±S形式給出，當(dāng)P＜0.05時(shí)認(rèn)為差異具有顯

7、著性。 結(jié)果:第一次豬蛔蟲(chóng)抗原激發(fā)后，三組實(shí)狗均產(chǎn)生了呼吸急促、費(fèi)力，聽(tīng)診雙肺有哮鳴音等哮喘反應(yīng)，激發(fā)后5分鐘處于哮喘急性發(fā)作期，實(shí)驗(yàn)狗呼吸動(dòng)力學(xué)、血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)均發(fā)生明顯變化，激發(fā)后30分鐘，重度哮喘表現(xiàn)有所緩解，各項(xiàng)指標(biāo)也出現(xiàn)回轉(zhuǎn)(見(jiàn)表1)。 此外，第一次激發(fā)后5分鐘、30分鐘血漿/清系列神經(jīng)肽、免疫介質(zhì)、炎癥細(xì)胞因子等指標(biāo)也發(fā)生了改變(見(jiàn)表2)。 第二次激發(fā)后，A組無(wú)哮喘發(fā)作表現(xiàn)，而B(niǎo)組、C組仍然有典型的哮

8、喘發(fā)作表現(xiàn)，A組的呼吸、血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)激發(fā)后變化不大，同B、C組比較差異具有顯著性(P＜0.05)(見(jiàn)表3)。 第二次抗原激發(fā)后，三組狗血漿/清放免法檢測(cè)指標(biāo)變化情況(見(jiàn)表4)。組A、C術(shù)后血漿SP、cAMP濃度及cAMP/cGMP比值與B組比較差異有顯著性(P＜0.05)。 結(jié)論:1.迷走神經(jīng)興奮是哮喘發(fā)作的重要因素，也是神經(jīng)肽、免疫介質(zhì)、炎癥細(xì)胞因子參與引起哮喘發(fā)作的關(guān)鍵步驟。2.雙側(cè)肺門(mén)迷走神經(jīng)切斷術(shù)阻斷了哮喘發(fā)病