缺血再灌通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)大鼠海馬tau蛋白過度磷酸化.pdf

1、老年性癡呆癥（AD）是最常見的神經(jīng)退行性病，占成人癡呆癥的60%。AD 患者臨床癥狀主要表現(xiàn)為認(rèn)知障礙、學(xué)習(xí)記憶力降低等，它的兩大神經(jīng)病理學(xué)特征是神經(jīng)元內(nèi)大量纖維纏結(jié)(NFTs）聚積及神經(jīng)細(xì)胞間的大量老年斑（SP）沉積。其中神經(jīng)纖維纏結(jié)（NFTs）主要由過度磷酸化的tau 蛋白形成。Tau 蛋白是微管相關(guān)蛋白，過度磷酸化后則失去了其促進(jìn)微管組裝、維持軸突運輸?shù)壬飳W(xué)功能。AD 病人的癡呆程度和過度磷酸化的tau 蛋白所形成的NFTs的數(shù)

2、量密切相關(guān)。Tau 蛋白磷酸化受蛋白激酶和磷酸酯酶的共同調(diào)節(jié)，其中糖原合酶激酶-3b Glycogen synthase kinase-3b GSK-3b和蛋白磷酸酯酶2A（PP2A）是參與AD樣tau 蛋白過度磷酸化的重要激酶和酯酶。缺血再灌是腦損傷過程中常見的重要病理生理過程之一，有學(xué)者提出AD的“缺血-再灌注”發(fā)病學(xué)說，認(rèn)為缺血再灌是散發(fā)性AD發(fā)病的重要的病理生理過程。但有關(guān)缺血再灌誘發(fā)AD的分子機(jī)制仍不清楚。缺血再灌可引起神經(jīng)細(xì)

3、胞的應(yīng)激反應(yīng)，如內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（ER Stress）。GRP78/Bip作為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)固有分子伴侶，在ER 應(yīng)激時表達(dá)增高，是ER激的標(biāo)記物。研究發(fā)現(xiàn)AD人腦中有著明顯的ER激和Bip表達(dá)增加。缺血或缺血再灌能否通過ER 應(yīng)激影響tau白磷酸化水平的改變，有待證實。ER激可激活P38JNK 二者是重要的應(yīng)激誘導(dǎo)的激酶。
　　 本研究以SD大鼠為研究對象，利用雙側(cè)頸動脈夾閉法復(fù)制腦缺血動物模型，觀察大鼠腦缺血20min、缺血20min再灌

4、不同時間（1d、3d、5d）的海馬tau 蛋白磷酸化水平的變化，GSK-3bPP2A表達(dá)及活性的變化，P38、JNK表達(dá)及活性的變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn)缺血20min后再灌可誘導(dǎo)大鼠海馬tau 蛋白在Ser396、Ser404、Ser198/199/202位點磷酸化水平顯著增高；Bip表達(dá)水平在缺血20min 及缺血20min后再灌不同時間（1d、3d、5d）均顯著增高；缺血及缺血再灌對P38、JNK、GSK3bPP2A 催化亞基（PP2Ac）表

5、達(dá)無明顯影響；P38 磷酸化水平在缺血及缺血再灌后顯著增高，JNK 磷酸化水平無顯著變化；GSK3b Ser9位點磷酸化水平在缺血20min 再灌3d、5d 顯著降低，Tyr216位點磷酸化水平在缺血及缺血再灌后均顯著增高；PP2Ac Tyr307位點磷酸化在缺血20min后再灌不同時間（1d、3d、5d）均顯著增高。為進(jìn)一步明確ER 應(yīng)激在缺血再灌誘導(dǎo)的tau 蛋白過度磷酸化中的關(guān)鍵作用，我們將ER 應(yīng)激抑制劑—PBA 補(bǔ)充給缺血再灌