電針對(duì)AD大鼠腦組織海馬內(nèi)GSK-3β活性及Tau蛋白過(guò)度磷酸化的影響.pdf

1、目的：探討老年性癡呆（AD）的發(fā)病機(jī)理。驗(yàn)證電針治療AD的療效及改善實(shí)驗(yàn)性癡呆癥狀。并進(jìn)一步探求電針治療對(duì)腦組織海馬內(nèi)Tau蛋白過(guò)度磷酸化的調(diào)節(jié)作用及其機(jī)制，為電針?lè)乐蜛D的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法：1、動(dòng)物篩選與分組將48只大鼠進(jìn)行行為學(xué)測(cè)試，隨機(jī)分成4組：假手術(shù)組、模型組、西藥組、電針組，每組12只。全部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物用相同的飼料喂養(yǎng)。2、AD模型制備：除假手術(shù)組外，其余動(dòng)物均用微量注射器每側(cè)側(cè)腦室各注STZ18ul(3

2、mg/kg，注射前將STZ 溶于人工腦脊液，濃度為25mg/ml)。第3天重復(fù)注射，劑量同前。假手術(shù)組以等量人工腦脊液替代STZ。術(shù)后青霉素注射3天，每只每次10萬(wàn)單位。二次造膜后常規(guī)飼養(yǎng)21天后分別予以電針和藥物治療。3、治療方法：電針治療組于第二次造模后第21d開(kāi)始進(jìn)行治療，選用華佗牌磁極針，常規(guī)消毒，選用疏密波，每日1次，每次治療30min；模型組及假手術(shù)組給予等體積的生理鹽水；藥物治療組以多奈哌齊按0.92mg/kg的劑量灌胃；

3、均每日1次。10天為1療程，共治療2個(gè)月。2個(gè)月后，對(duì)全部大鼠進(jìn)行行為學(xué)測(cè)試獲取數(shù)據(jù)。并立即灌注固定完整取出鼠腦，置固定液中,24小時(shí)后行石蠟包埋切片。每只大鼠海馬CA1區(qū)出現(xiàn)后連續(xù)冠狀切片，放入0.01M PBST的溶液中進(jìn)行免疫組化染色。采用免疫組化法觀察AD模型大鼠海馬內(nèi)Tau蛋白AD特異性位點(diǎn)磷酸化水平（Thr231）及GSK-3β的活性。
　　 結(jié)果：1、行為學(xué)實(shí)驗(yàn)顯示：與假手術(shù)組大鼠相比，模型大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力顯著降

4、低（P＜0.01）；與模型組比較，各治療組大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力顯著改善（P＜0.05）。2、大鼠海馬組織內(nèi)GSK-3β活性及Tau蛋白過(guò)度磷酸化觀測(cè)：與假手術(shù)組大鼠相比，模型大鼠海馬組織內(nèi)GSK-3β活性顯著升高（P＜0.01），與模型對(duì)照組比較，各治療組大鼠海馬組織內(nèi)GSK-3β活性明顯減弱（P＜0.01）。
　　 結(jié)論：電針對(duì)AD大鼠有明顯的治療作用。其作用機(jī)制之一是通過(guò)減弱海馬組織內(nèi)GSK-3β活性抑制Tau蛋白過(guò)度磷酸化，