硫化氫通過上調(diào)SIRT1減輕慢性應(yīng)激誘導(dǎo)的大鼠海馬內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激.pdf

1、【研究背景與目的】：
　　慢性應(yīng)激可損傷海馬神經(jīng)元。硫化氫(Hydrogen sulfide, H2S)是一種神經(jīng)保護作用的新型氣體信號分子。我們以往的工作發(fā)現(xiàn) H2S可拮抗慢性應(yīng)激誘導(dǎo)的大鼠海馬損傷，但其機制尚未闡明。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(endoplasmic reticulum, ER)應(yīng)激在神經(jīng)損傷中具有重要地位。沉默信息因子1(Silence information regulator-1, SIRT1)是一種組蛋白脫乙酰酶，具有神經(jīng)

2、保護作用。據(jù)此，我們推測 H2S可通過上調(diào) SIRT1的表達(dá)拮抗慢性應(yīng)激誘導(dǎo)的海馬 ER應(yīng)激而實現(xiàn)其抗慢性應(yīng)激誘導(dǎo)海馬損傷的作用。
　　本研究擬建立慢性非預(yù)期溫和性應(yīng)激(Chronic Unpredictable Mild Stress, CUMS)模型，探討H2S對慢性應(yīng)激致海馬ER應(yīng)激的拮抗作用并研究SIRT1對H2S這一作用的介導(dǎo)效應(yīng)。
　　【方法】：
　　采用大鼠腦立體定位儀對Wistar大鼠行右側(cè)側(cè)腦室埋管，

3、以微量注射器對大鼠側(cè)腦室注射SIRT1抑制劑Sirtinol(10 nmol/只，icv,2 w)，腹腔注射NaHS(30,100μmol/kg, ip,2 w)，Western blotting檢測SIRT1,C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)，Cleaved caspase-12和糖調(diào)節(jié)蛋白78(Glucose regulated protein78,GRP78)蛋白的表達(dá)。
　　

4、【結(jié)果】：
　　1. H2S減輕 CUMS大鼠海馬 ER應(yīng)激
　　NaHS治療組[CUMS4 w，在CUMS后2 w給以30或100μmol/kg(ip)治療]大鼠海馬ER應(yīng)激標(biāo)志蛋白GRP78, CHOP and Cleaved caspase-12表達(dá)量顯著低于CUMS(4 w)組，表明H2S可抑制CUMS誘導(dǎo)的大鼠海馬 ER應(yīng)激。
　　2. H2S上調(diào) CUMS大鼠海馬 SIRT1的表達(dá)
　　CUMS(4

5、w)可明顯降低大鼠海馬SIRT1的表達(dá)水平；而NaHS(30或100μmol/kg, ip,2 w)可逆轉(zhuǎn)CUMS對大鼠海馬SIRT1表達(dá)的抑制作用，提示 H2S可上調(diào) CUMS大鼠海馬 SIRT1的表達(dá)。
　　3.抑制 SIRT1可逆轉(zhuǎn)H2S對CUMS誘導(dǎo)海馬 ER應(yīng)激的拮抗作用
　　與NaHS治療組[CUMS4 w, CUMS2 w后給以NaHS(30μmol/kg, ip)處理2 w]比較，sirtinol處理組[CU

6、MS4 w, CUMS后2 w, sirtinol(10 nmol/只, icv)合用NaHS(30μmol/kg, ip)處理2 w]海馬組織ER應(yīng)激相關(guān)標(biāo)志蛋白(GRP78, CHOP and Cleaved caspase-12)表達(dá)水平顯著增加，表明 SIRT1抑制劑(sirtinol)可逆轉(zhuǎn) H2S對CUMS所致海馬 ER應(yīng)激的拮抗作用。
　　【結(jié)論】：
　　1. H2S可通過改善 ER應(yīng)激拮抗 CUMS所致海馬神