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文檔簡(jiǎn)介
1、嚴(yán)重急性呼吸綜合征(SARS)是一種新出現(xiàn)的感染性疾病,其致病體為SARS-CoV。SARS能夠?qū)е聡?yán)重急性肺損傷,許多病人惡化為急性呼吸窘迫綜合征(ARDS),具有很高的致死率。此外,受感染者的多個(gè)組織、器官受損。SARS具有較高的發(fā)病率、致死率,且傳播速度快,嚴(yán)重影響了社會(huì)、經(jīng)濟(jì)的發(fā)展。 研究表明,Spike(S)蛋白是SARS-CoV表面最重要的結(jié)構(gòu)蛋白,能夠介導(dǎo)病毒與宿主細(xì)胞受體的結(jié)合和膜融合。同時(shí),它能夠誘導(dǎo)宿主的免疫反應(yīng),產(chǎn)
2、生中和抗體。因此,SARS-CoV S蛋白對(duì)于確定SARS-CoV的致病機(jī)理及疫苗研發(fā)非常重要。由于SARS-CoV的S蛋白本身的編碼序列在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的表達(dá)量極低,難以滿足研究需要。為了解決這個(gè)問(wèn)題,SARS-CoV的S蛋白本身的編碼序列被替換為人類(lèi)基因高頻使用的密碼子,S蛋白得到高量表達(dá),獲得了大量有生物活性的S蛋白。為SARS-CoV S蛋白介導(dǎo)的致病機(jī)理的進(jìn)一步研究和SARS-CoV疫苗的研發(fā)提供了基礎(chǔ)。 SARS-C
3、oV的受體結(jié)合結(jié)構(gòu)域(RBD)定位于S蛋白的第319到510位氨基酸(AA319-510)。這段多肽能夠介導(dǎo)病毒與其受體ACE2結(jié)合,決定了病毒的宿主范圍和細(xì)胞向性。同時(shí),它含有SARS-CoV主要的中和表位,能夠誘導(dǎo)中和抗體。通過(guò)人類(lèi)密碼子優(yōu)化的策略,我們獲得了大量有生物活性的RBD S蛋白。SARS-CoV進(jìn)入細(xì)胞由S蛋白介導(dǎo)。我們的研究表明,RBD S蛋白能單獨(dú)通過(guò)病毒受體ACE2進(jìn)入靶細(xì)胞。同時(shí),RBD S蛋白N連接的糖基化的去
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