大承氣湯修復(fù)多器官功能障礙綜合癥腸神經(jīng)-CAJAL間質(zhì)細(xì)胞-平滑肌細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)損傷實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、多器官功能障礙綜合癥（multiple organ dysfunction syndrome，MODS）是一種在嚴(yán)重感染、創(chuàng)傷、休克及大手術(shù)等原發(fā)病發(fā)生后，機(jī)體同時(shí)或序貫發(fā)生兩個(gè)或兩個(gè)以上器官或系統(tǒng)功能障礙的臨床綜合征，以高代謝、高動(dòng)力循環(huán)狀態(tài)、過度失控的炎癥反應(yīng)和器官功能障礙為特征的臨床綜合征，是腹部外科患者死亡的重要原因?，F(xiàn)在觀點(diǎn)認(rèn)為，MODS一般由全身炎癥反應(yīng)綜合征（systemic inflammation response s

2、yndrome，SIRS）和代償性抗炎性反應(yīng)綜合征（Compensatroy anti-inflammatory response syndrome，CARS）發(fā)展而來。胃腸道被認(rèn)為是促發(fā)SIRS和MODS的始動(dòng)器官與靶部位。胃腸功能狀態(tài)被認(rèn)為是判斷危重病人預(yù)后的一項(xiàng)重要指標(biāo)。胃腸運(yùn)動(dòng)功能的恢復(fù)有助于有效地阻斷MODS的進(jìn)一步發(fā)展。胃腸道Cajal間質(zhì)細(xì)胞（interstitial cells of Cajal，ICC）相互間形成網(wǎng)絡(luò)狀

3、結(jié)構(gòu)廣泛分布于胃腸道各節(jié)段和各肌層。目前認(rèn)為ICC有三個(gè)主要功能：①是胃腸肌肉的起搏細(xì)胞，能產(chǎn)生和傳導(dǎo)生理性慢波，控制胃腸道平滑肌的收縮和蠕動(dòng)。肌間ICC（ICC-MY）具有基本節(jié)律起搏和傳播功能，能夠產(chǎn)生慢波；②是胃腸道腸神經(jīng)系統(tǒng)（enteric nerve system，ENS）信號(hào)向平滑肌細(xì)胞（smooth muscle cells，SMC）的傳送的信息整合中轉(zhuǎn)站。深部肌間神經(jīng)叢ICC（ICC-DMP）是腸神經(jīng)作用的首要靶細(xì)胞，腸

4、神經(jīng)釋放的遞質(zhì)主要是通過ICC-DMP來調(diào)節(jié)；從而在調(diào)控胃腸動(dòng)力的發(fā)生與變化。另外ENS運(yùn)動(dòng)末梢、肌間ICC、SMC相互聯(lián)系形成網(wǎng)絡(luò)，構(gòu)成胃腸動(dòng)力基本功能單位（basic functional unit of gastrointestinal motility，BFUGM），腸神經(jīng)-ICC-平滑肌網(wǎng)絡(luò)與胃腸運(yùn)動(dòng)功能障礙密切相關(guān)；③促進(jìn)電活動(dòng)擴(kuò)布。 目的：以細(xì)菌性腹膜炎致MODS大鼠模型為研究對(duì)象，觀察MODS大鼠模型小腸神經(jīng)-I

5、CC-平滑肌網(wǎng)絡(luò)的形態(tài)學(xué)變化以及大承氣湯（Da-Cheng-Qi-Tang，DCQT）治療的影響，探討MODS致胃腸運(yùn)動(dòng)障礙的產(chǎn)生機(jī)制和大承氣湯治療MODS機(jī)理。 方法：健康成年Wistar大鼠100只，雌雄各半，體重200g-250g，隨機(jī)分組如下：對(duì)照組（20只）、MODS模型組（40只）和DCQT治療2組（40只）。對(duì)照組每只大鼠予腹腔注射1ml生理鹽水。MODS模型組和DCQT治療組每只大鼠予腹腔注射1mlE．coloi

6、．混懸液，建立細(xì)菌性腹膜炎致MODS模型。DCQT治療組于造模前2日給予DCQT灌胃，2次/日，每次1ml/100g。造模24小時(shí)后取存活大鼠上段小腸組織制作腸肌層全厚組織標(biāo)本，進(jìn)行c-Kit抗體和囊泡裝乙酰膽堿轉(zhuǎn)運(yùn)體（VAChT）抗體，血管活性腸肽（VIP）抗體，P物質(zhì)（SP）抗體以及神經(jīng)型一氧化氮合酶（nNOS）抗體免疫熒光雙標(biāo)記染色后用于激光掃描共聚焦顯微鏡檢測(cè)、分析。 結(jié)果： 1．大體標(biāo)本較之對(duì)照組，MODS組大

7、鼠胃腸極度擴(kuò)張，胃腸梗阻征象明顯；DCQT治療組胃腸擴(kuò)張、梗阻較MODS組明顯減輕。 2．免疫熒光共聚焦顯微鏡檢測(cè)①ICC-DMP網(wǎng)絡(luò)：與對(duì)照組相比，MODS組大鼠ICC-DMP數(shù)量明顯減少（p<0．01），ICC突觸的數(shù)量減少，相互間的連接不連續(xù)，細(xì)胞熒光IOD值減弱（p<0．01），完整的網(wǎng)絡(luò)樣結(jié)構(gòu)消失；DCQT治療組大鼠ICC-DMP數(shù)量比MODS組明顯增多（p<0．01），ICC-DMP突觸明顯增多，細(xì)胞的熒光IOD值比

8、MODS組明顯增加（p<0．01），基本保持網(wǎng)絡(luò)狀結(jié)構(gòu)；②腸神經(jīng)：與對(duì)照組相比，MODS組大鼠小腸乙酰膽堿（Ach）／P物質(zhì)／（SP）／血管活性腸肽（VIP）／氮能（NO）神經(jīng)纖維數(shù)量明顯減少（p<0．01），熒光IOD值明顯減弱（p<0．01），神經(jīng)網(wǎng)結(jié)構(gòu)紊亂，彼此間的連接減少，完整的神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)樣結(jié)構(gòu)消失。DCQT治療組大鼠小腸乙酰膽堿（Ach）／P物質(zhì)／（SP）／血管活性腸肽（VIP）／氮能（NO）神經(jīng)纖維數(shù)量比MODS組明顯增多（p

9、<0．01）基本維持神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)狀結(jié)構(gòu)，細(xì)胞的熒光IOD值比MODS組明顯增加（p<0．01），基本維持神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)狀結(jié)構(gòu)；③腸神經(jīng)-ICC-平滑肌網(wǎng)絡(luò)：與對(duì)照組相比，MODS組大鼠腸神經(jīng)與ICC數(shù)量明顯減少，相互間連接疏松，腸神經(jīng)-ICC-平滑肌網(wǎng)絡(luò)明顯受損。DCQT治療組大鼠腸神經(jīng)與ICC數(shù)量較MODS組明顯增加，腸神經(jīng)-ICC-平滑肌網(wǎng)絡(luò)基本保持完整。 結(jié)論：①細(xì)菌性腹膜炎致MODS組大鼠胃腸極度擴(kuò)張，胃腸梗阻征象明顯；DCQT治

10、療能夠顯著改善胃腸麻痹梗阻征；②MODS狀態(tài)下，ICC-DMP數(shù)量減少，網(wǎng)絡(luò)受到破壞；DCQT的防治可以減輕ICC-DMP的損傷，基本維持ICC-DMP網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的完整；⑨MODS狀態(tài)下，小腸Ach/SP/VIP/氮能神經(jīng)和ICC-DMP數(shù)量減少，腸神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)樣結(jié)構(gòu)受到破壞；DCQT的防治能夠減輕小腸神經(jīng)的損傷，維持腸神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)樣結(jié)構(gòu)的完整；④MODS狀態(tài)下，ICC-DMP和小腸神經(jīng)纖維數(shù)量明顯減少，相互間聯(lián)系中斷紊亂，腸神經(jīng)-ICC-平滑肌