生存素反義寡核酸在胃癌細胞系中對表阿霉素的增敏性及其信號轉導途徑研究.pdf

1、目的：近年來有研究表明經(jīng)相同的化療過程后，survlvin表達陰性的患者臨床癥狀及病理表現(xiàn)緩解率均高于survivin表達陽性的患者，這說明survivin基因的表達可能與腫瘤對化療藥物的敏感性有關，但其具體機制目前還未完全闡明。本實驗通過構建survivin反義核酸，研究其在胃癌化療中對表阿霉素的增敏作用及可能的作用機制 方法：設計并構建survivin反義寡核酸鏈（ASODN）及正義寡核酸對照鏈，采用脂質體法轉染胃癌SGC-

2、7901細胞，MTT法檢測轉染組細胞抑制率并篩選出適宜濃度，不同濃度表阿霉素處理胃癌SGC-7901細胞，MTT法檢查表阿霉素對其生長抑制作用，篩選出對SGC-7901細胞生長抑制率較低的4組濃度做為待測濃度，將2種因素聯(lián)合作用于SGC-7901細胞，Western-blot法檢查survivin蛋白表達情況，MTT法檢查表阿霉素對其抑制率，流式細胞儀檢查細胞周期，Annexin V-FITC法檢查細胞凋亡情況，RT-PCR法檢查bcl

3、-2、SMac mRNA表達情況。 結果：經(jīng)200nm/L ASODN反義核酸處理后的SGC-7901細胞對表阿霉素的敏感性明顯增加：MTT法示轉染后細胞經(jīng)表阿霉素作用24h后，抑制率較單獨使用表阿霉素的未轉染組明顯提高（P<0.05，q>1.15），流式細胞儀檢查示聯(lián)合作用組使細胞G2/M期細胞數(shù)較單獨使用表阿霉素組明顯增多：western-blot檢查示轉染后survivin蛋白表達水平顯著降低，Annexin V-FITC