烏司他丁對心肺復(fù)蘇后大鼠腦細胞線粒體途徑凋亡與自噬的影響.pdf

1、目的:
　　如何救治心臟驟停后腦損害是近年來CPR研究的焦點。UTI可以通過多種途徑減輕大腦皮質(zhì)神經(jīng)細胞的損害,對全腦缺血再灌注損傷起保護作用。理論上,UTI穩(wěn)定溶酶體膜、抑制溶酶體酶釋放的作用除可以促使溶酶體通過自噬清除受損線粒體和細胞器外,還可以影響線粒體途徑凋亡。本研究就是通過觀察UTI干預(yù)對CPR后大鼠腦組織凋亡和自噬,線粒體損傷,線粒體途徑凋亡相關(guān)因子bax/bcl-2和Caspase-3、自噬相關(guān)蛋白分子beclin-

2、1和LC3A/B表達的影響來驗證UTI是否能促進自噬和抑制凋亡而減輕心臟驟停后腦損害。
　　方法:
　　本研究共三部分,前兩部分各有72只SD大鼠,隨機均分為烏司他丁干預(yù)組(UTI組)和生理鹽水對照組(NS組),建立CA/CPR模型;以CPR后1、3和7d為觀察終點,每個觀察終點事先分配等量動物進行實驗研究。第三部分在前兩部分基礎(chǔ)上另取8只大鼠隨機分作兩組,不予建立CA/CPR模型,在分別給予1次UTI或NS干預(yù)后24h處死

3、取材作為基礎(chǔ)值(觀察終點記作0d)。采用經(jīng)皮電刺激心外膜的方法建立CA模型,在CA6min后進行CPR。在ROSC后UTI組立即給予UTI5000單位/kg,溶于NS1ml,腹腔注射,每8小時1次,連續(xù)應(yīng)用直至觀察終點;NS組則予以等量NS腹腔注射進行對照。
　　結(jié)果:
　　①在CPR后1、3和7d,UTI組大鼠皮層和海馬CA1區(qū)TUNEL陽性標記的AI、電鏡下凋亡細胞、促凋亡因子bax和Caspase-3表達的IOD低于對

4、照組(P<0.05),抗凋亡因子bcl-2、自噬標記蛋白beclin-1和LC3B的表達的IOD和電鏡下自噬多于對照組(P<0.05)。
　?、谠贑PR后1d、3d和7d時,UTI組的大腦組織細胞線粒體平均ROS含量少于NS組(P<0.05);MMP和MPTP的RFU高于NS組(P<0.05);電鏡下UTI組的皮層和海馬CA1區(qū)細胞線粒體損傷Flameng評分低于NS組(P<0.05)。
　?、畚窗l(fā)生CA的動物bax和bcl

5、-2、LC3A和LC3B的表達量都很少,經(jīng)歷CA/CPR后,它們的表達均明顯增加。與NS組相比,在CPR后1d、3d和7d時,UTI組bax/bcl-2的mRNA比例和LR明顯降低(P<0.05)。LC3B/LC3A的mRNA比例和LR明顯增加(P<0.05)。
　　結(jié)論:
　　在CA6min的大鼠模型中,UTI干預(yù)可以減輕CPR后大鼠腦組織線粒體損傷、抑制bax和Caspase-3等促凋亡因子表達,促進抗凋亡因子bcl-2