烏司他丁在大鼠腦出血后腦損傷中保護(hù)作用的研究.pdf

1、 目的：1. 研究腦出血(ICH)后繼發(fā)性腦損害及其機(jī)制；2.通過觀察烏司他丁(UTI)在ICH后對(duì)氧自由基、炎性反應(yīng)、腦水腫、腦組織病理?yè)p害及細(xì)胞凋亡的影響來探討UTI對(duì)繼發(fā)性腦損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制；3.為臨床應(yīng)用UTI治療ICH提供理論及實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法：1.分組：將雄性SD大鼠(n=90)隨機(jī)分為3組即UTI治療組(n=30)、ICH對(duì)照組(n=30)和假手術(shù)組(n=30),再將每組分為12h、1d、2d、3d、7d及14d6個(gè)

2、時(shí)間點(diǎn),每個(gè)時(shí)間點(diǎn)5只大鼠。2.造模：ICH對(duì)照組和UTI治療組均采用立體定向技術(shù)把50ul自體不凝血注入大鼠右側(cè)尾狀核制作ICH模型,假手術(shù)組的手術(shù)操作與其他兩組相同,但不向尾狀核內(nèi)注血,留針時(shí)間超過10分鐘。3.給藥：ICH對(duì)照組和假手術(shù)組術(shù)后每天腹腔注射生理鹽水1ml, UTI治療組在術(shù)后予UTI50000u/kg.d加入1ml生理鹽水腹腔注射,直到相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)。4.觀察：在術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)對(duì)各觀察指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定,采用Garcia方法進(jìn)行

3、神經(jīng)功能障礙評(píng)分,干濕法測(cè)定腦組織含水量,放射免疫法測(cè)定IL-1β、IL-6及TNF-α含量,黃嘌呤氧化酶法測(cè)定SOD活性,硫代巴比妥酸法測(cè)定MDA含量,HE染色病理切片觀察血腫周圍腦組織病理改變, TUNEL原位染色法測(cè)定細(xì)胞凋亡,計(jì)數(shù)陽(yáng)性細(xì)胞。5.采用SPSS17.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果：1. 與假手術(shù)組比較,ICH對(duì)照組神經(jīng)功能障礙評(píng)分在12h-14d明顯降低,血腫周圍腦組織含水量在1d-7d明顯增高, SOD活性在12h-7

4、d明顯降低, MDA含量在1d-7d明顯增高,IL-1β含量在12h-3d明顯增高, IL-6含量在1d-7d明顯增高, TNF-α含量在12h-3d明顯增高(P<0.05)；與假手術(shù)組比較,UTI治療組神經(jīng)功能障礙評(píng)分在12h-7d明顯降低,血腫周圍腦組織含水量在1d-3d明顯增高, SOD活性在1d-3d明顯降低,MDA含量在1d-7d明顯增高, IL-1β在12h-3d明顯增高,IL-6含量在1d-3d明顯增高,TNF-α含量在1

5、d-2d明顯增高(P<0.05)；與ICH對(duì)照組比較,UTI治療組神經(jīng)功能障礙評(píng)分在2d-7d明顯增高,血腫周圍腦組織含水量在1d-7d明顯降低,SOD活性在1d-3d明顯增高, MDA含量在1d-7d明顯降低,IL-1β含量在2d-3d明顯降低, IL-6含量在2d-3d明顯降低,TNF-α含量在1d-2d明顯降低(P<0.05)；2.ICH對(duì)照組12h可見血腫周圍輕度腦水腫,細(xì)胞間隙稍增寬,少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；1d可見神經(jīng)細(xì)胞輕度腫脹

6、,神經(jīng)元排列紊亂,數(shù)目較前減少,并可見炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；2d可見大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn),以中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)為主,神經(jīng)細(xì)胞高度水腫,呈空泡樣變,尼氏體消失,胞核固縮、濃染。3d時(shí)血腫周圍高度腦水腫,有大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn),可見部分神經(jīng)元變性壞死,細(xì)胞核結(jié)構(gòu)變模糊,可見膠質(zhì)細(xì)胞增生,血腫周圍可見吞噬含鐵血黃素的小膠質(zhì)細(xì)胞。7d可見血腫明顯縮小,以膠質(zhì)細(xì)胞增生為主。14d主要是膠質(zhì)細(xì)胞增生和血管增生。UTI治療組1d-7d的腦組織水腫和炎性細(xì)胞浸潤(rùn)的程度及后

7、期的膠質(zhì)細(xì)胞增生均低于ICH對(duì)照組。3. 假手術(shù)組可見少量TUNEL染色陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)；與假手術(shù)組相比較,ICH對(duì)照組和UTI治療組在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的TUNEL染色陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)均顯著增高(P<0.05),ICH組増高更明顯,在1d~14d與UTI治療組的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；ICH對(duì)照組和UTI治療組在12h即可見大量TUNEL染色陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá),且3d達(dá)到高峰。4.直線相關(guān)分析：ICH對(duì)照組和UTI治療組的各時(shí)間點(diǎn),神經(jīng)功能障礙評(píng)分

8、與腦組織含水量、IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA含量及細(xì)胞凋亡均呈明顯負(fù)相關(guān),與SOD活性呈明顯正相關(guān)(P<0.05)；而腦組織含水量與IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA含量及細(xì)胞凋亡均呈明顯正相關(guān),與SOD活性呈明顯負(fù)相關(guān)(P<0.05)。結(jié)論：1.自體血注入法制作ICH模型操作簡(jiǎn)單,重復(fù)性好,且與人ICH病理生理變化基本一致。2. ICH大鼠有明顯神經(jīng)功能損害、腦組織水腫及病理?yè)p害。3.實(shí)驗(yàn)大鼠ICH后,血腫周圍出現(xiàn)炎