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1、為了解近年來河南省規(guī)?;膛雠魅拘员菤夤苎椎牧餍星闆r,課題組于2015年2月至8月,采用分層隨機(jī)抽樣法,對河南省5個地區(qū)(即豫東、豫西、豫南、豫北及豫中)的12個規(guī)模化奶牛場進(jìn)行抽樣調(diào)查。隨機(jī)選取牛群中不同年齡階段、不同健康狀況的牛,共采集血液樣品400份、鼻拭子和陰道拭子樣品776份,按常規(guī)方法分離血清,提取拭子DNA并冷凍保存待檢。
首先運(yùn)用酶聯(lián)免疫吸附實驗方法(ELISA)對采集的400份血清樣品進(jìn)行檢測,共檢測出I
2、BRV抗體陽性血清210份,總體陽性率為52.50%(210/400),場陽性率為100%。結(jié)果顯示:5個地區(qū)的陽性率由低到高依次為豫東(20.00%)豫中(36.75%)豫北(60.84%)、豫西(84.62%)豫南(85.07%);不同年齡段奶牛的陽性率不同,犢牛、后備青年牛、1胎、2胎、3胎、4胎以上牛分別是18.18%、11.11%、59.00%、70.69%、66.67%、60.71%;患病牛IB R V的平均血清陽性率為57
3、.14%,明顯高于外觀健康牛的51.52%。結(jié)果表明,河南省奶牛場普遍感染IBRV。與2010年調(diào)查的結(jié)果相比略微下降,但是仍處于相對較高的水平,豫東、豫中地區(qū)有所下降,而豫西、豫南、豫北地區(qū)均有不同程度的升高。而且隨著年齡的增長,血清抗體陽性率整體上呈上升的趨勢。最后發(fā)現(xiàn)IB R V感染與奶牛的多種臨床病癥有密切的關(guān)系,其中患乳房炎和繁殖障礙牛的平均陽性率較高。
其次運(yùn)用熒光定量PCR方法,對采集的440頭牛的776份拭子樣
4、品進(jìn)行了檢測,共檢測出陽性68頭,總體陽性率為15.45%(68/440),場陽性率為100%,其中陽性率最高場達(dá)到了68.00%,最低場為6.67%。結(jié)果顯示:5個地區(qū)的陽性率由低到高依次為豫東(10.00%)、豫中(10.78%)、豫北(12.04%)、豫西(20.00%)、豫南(35.82%);不同年齡段奶牛的陽性率不同,犢牛、后備青年牛、1胎、2胎、3胎、4胎以上牛分別是3.57%、6.67%、23.53%、26.22%、14.
5、55%、28.57%;患病牛IB R V的平均拭子陽性率為28.13%,明顯高于外觀健康牛的13.23%。與血清流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果相比,拭子的陽性率明顯較低,但是兩者結(jié)果一致,均能有效的反映出各個地區(qū)IB R V的感染情況。其中豫西、豫南地區(qū)的陽性率較高,明顯高于豫東、豫中和豫北地區(qū)。并且隨著牛年齡的增長,拭子的陽性率整體呈上升的趨勢。不同健康狀況牛的拭子陽性率中,患有乳房炎牛群的陽性率最高。
本次實驗通過血清學(xué)和病原學(xué)調(diào)查相結(jié)
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