黃荊子木脂類化合物抑制人宮頸癌Hela細(xì)胞生長和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:研究黃荊子提取和分級(jí)分離的4種木脂類化合物(Comp6、Comp7、Comp8和Comp10)抑制體外培養(yǎng)人宮頸癌Hela細(xì)胞生長和誘導(dǎo)凋亡作用,并初步探討其分子機(jī)制。
　　方法:體外培養(yǎng)人宮頸癌(Hela)細(xì)胞,BrdU摻入法測(cè)定細(xì)胞核酸合成;平皿集落形成法和軟瓊脂培養(yǎng)集落形成法檢測(cè)細(xì)胞生長和集落形成能力;PI染色流式細(xì)胞術(shù)(FCM)分析細(xì)胞凋亡率和細(xì)胞周期累積百分率;FITC標(biāo)記間接免疫熒光FCM觀察細(xì)胞Mcl-1蛋白表

2、達(dá)。
　　結(jié)果:黃荊子提取和分級(jí)分離得到的4種木脂類化合物(Comp6、Comp7、Comp8和Comp10)對(duì)人宮頸癌Hela細(xì)胞核酸合成均有抑制作用,以Comp8效價(jià)強(qiáng)度最高,其 BrdU摻入抑制的IC50值為0.93μg/mL;約為紫杉醇(Tax,IC50=0.45μg/mL)的1/2。平皿集落形成法檢測(cè)數(shù)據(jù)顯示:4種木脂類化合物以濃度依賴方式抑制Hela細(xì)胞生長,其中Comp8的作用最強(qiáng)(IC50=0.13μg/mL)。軟

3、瓊脂培養(yǎng)集落形成法的結(jié)果表明:4種木脂類化合物均具有抑制 Hela細(xì)胞集落形成作用,呈濃度依賴性,Comp8的IC50為0.57μg/mL,是4種木脂類化合物中最小者。PI染色FCM分析證實(shí):4種木脂類化合物均能有效誘導(dǎo)Hela細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期G1/G0期阻滯,Comp8促進(jìn)細(xì)胞凋亡的EC50為22.9μg/mL與Tax的EC50(31.0μg/mL)接近。間接免疫熒光FCM測(cè)定發(fā)現(xiàn)Comp8顯著下調(diào)Hela細(xì)胞Mcl-1蛋白表達(dá),呈