化瘤散結(jié)丹（含藥血清）誘導(dǎo)人宮頸癌細(xì)胞系Hela細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、研究目的:1.運(yùn)用血清藥理學(xué)方法研究抗腫瘤新藥化瘤散結(jié)丹對(duì)人宮頸癌細(xì)胞系HeLa細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用和凋亡誘導(dǎo)作用及對(duì)細(xì)胞周期的影響.2.探討化瘤散結(jié)丹抗腫瘤作用的可能機(jī)理.3.了解化瘤散結(jié)丹的急性毒理效應(yīng).研究方法:1.按照血清藥理學(xué)方法的要求制備含藥血清:將化瘤散結(jié)丹制成水煎劑給家兔灌胃,獲取兔血并分離血清.2.細(xì)胞培養(yǎng):將人宮頸癌細(xì)胞系HeLa細(xì)胞接種在含10％胎牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)基中,置37℃含5%C0<,2>的培養(yǎng)箱

2、中培養(yǎng).3.選擇不同濃度的含藥血清與人宮頸癌細(xì)胞系HeLa細(xì)胞共同作用24小時(shí),用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變;用MTT還原法檢測(cè)光密度值(OD值),計(jì)算抑制率;用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)化瘤散結(jié)丹誘導(dǎo)HeLa細(xì)胞凋亡的效應(yīng)以及對(duì)細(xì)胞周期的影響.4.急性毒性實(shí)驗(yàn)采用小鼠以口服灌胃方式給藥,連續(xù)觀察7天,統(tǒng)計(jì)動(dòng)物死亡數(shù),獲取相關(guān)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)并用改良寇氏法測(cè)定其LD<,50>.研究結(jié)論:1.化瘤散結(jié)丹(含藥血清)可抑制人宮頸癌細(xì)胞系HeLa細(xì)胞

3、的生長(zhǎng);2.化瘤散結(jié)丹(含藥血清)大、中劑量組可誘導(dǎo)HeLa細(xì)胞凋亡;3.化瘤散結(jié)丹(含藥血清)對(duì)HeLa細(xì)胞增殖周期有影響;細(xì)胞周期G<,2>/M期阻滯可能是化瘤散結(jié)丹誘導(dǎo)HeLa細(xì)胞凋亡的機(jī)制之一.4.化瘤散結(jié)丹(含藥血清)誘導(dǎo)HeLa細(xì)胞凋亡與藥物濃度及作用時(shí)間相關(guān):濃度太小,時(shí)間太短(2.5%,12h)不足以誘導(dǎo)凋亡;濃度太高,時(shí)間太長(zhǎng)(15%,36h)容易引起細(xì)胞壞死.5.化瘤散結(jié)丹經(jīng)口灌胃的LD<,50>為:10.11g/k