豬帶絳蟲囊蟲病DNA疫苗的中試及免疫效力研究.pdf

1、豬帶絳蟲囊蟲病是重要的人畜共患病之一,在拉美、非洲及亞洲多國有廣泛的分布.在中國西北、西南地區(qū),該病的流行不僅對人體健康帶來危害而且產生巨大的經濟損失.雖然近年該病的流行呈現(xiàn)一定的下降趨勢,但遠未被控制.有效疫苗的研制和應用是預防該病流行的重要手段之一,這對保護人民身體健康,減少經濟損失具有重要意義.本課題在已有的豬帶絳蟲囊尾蚴DNA疫苗pcDNA3-cC1的基礎上,對該疫苗的中試工藝、效力試驗和安全性的若干關鍵問題進行了較為系統(tǒng)的研究

2、.具體包括:(1)制備工藝和質檢標準的確立:采用流加補料和變溫法為基礎的50L發(fā)酵罐發(fā)酵方法;在傳統(tǒng)的堿法抽提質粒的基礎上建立了疫苗質粒中試規(guī)模的質粒制備工藝;制定了相應的質量檢測標準.(2)疫苗有效性的中間試驗:以囊蟲卵攻擊疫苗接種后的仔豬,結果顯示接種DNA疫苗后仔豬的減蟲率達到80﹪以上.DNA疫苗的免疫期試驗結果顯示免疫4個月后進行攻擊的3批疫苗與免疫后3周攻擊的對應批次的疫苗產生的保護率接近,表明接種該DNA疫苗的仔豬對抗囊蟲

3、卵攻擊的保護力能維持4個月以上,且這種保護力無明顯變化.另外,就聯(lián)合免疫策略對保護水平的影響進行了分析:一方面采用DNA疫苗初免,相應抗原的蛋白質疫苗加強免疫的疫苗接種策略,同時以僅接種蛋白質疫苗的接種組作為對照觀察組.疫苗接種6周后兩種免疫方式的減蟲率無明顯差異,而疫苗接種20周后聯(lián)合免疫組的減蟲率相對較高,表明該法能獲得相對較長的保護期.抗體亞型檢測和淋巴細胞增殖實驗的結果提示,這種保護期的差異可能與兩種接種方法產生的免疫應答類型的