豬帶絳蟲囊蟲病DNA疫苗的中試及免疫效力研究.pdf

1、豬帶絳蟲囊蟲病是重要的人畜共患病之一,在拉美、非洲及亞洲多國(guó)有廣泛的分布.在中國(guó)西北、西南地區(qū),該病的流行不僅對(duì)人體健康帶來危害而且產(chǎn)生巨大的經(jīng)濟(jì)損失.雖然近年該病的流行呈現(xiàn)一定的下降趨勢(shì),但遠(yuǎn)未被控制.有效疫苗的研制和應(yīng)用是預(yù)防該病流行的重要手段之一,這對(duì)保護(hù)人民身體健康,減少經(jīng)濟(jì)損失具有重要意義.本課題在已有的豬帶絳蟲囊尾蚴DNA疫苗pcDNA3-cC1的基礎(chǔ)上,對(duì)該疫苗的中試工藝、效力試驗(yàn)和安全性的若干關(guān)鍵問題進(jìn)行了較為系統(tǒng)的研究

2、.具體包括:(1)制備工藝和質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)的確立:采用流加補(bǔ)料和變溫法為基礎(chǔ)的50L發(fā)酵罐發(fā)酵方法;在傳統(tǒng)的堿法抽提質(zhì)粒的基礎(chǔ)上建立了疫苗質(zhì)粒中試規(guī)模的質(zhì)粒制備工藝;制定了相應(yīng)的質(zhì)量檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn).(2)疫苗有效性的中間試驗(yàn):以囊蟲卵攻擊疫苗接種后的仔豬,結(jié)果顯示接種DNA疫苗后仔豬的減蟲率達(dá)到80﹪以上.DNA疫苗的免疫期試驗(yàn)結(jié)果顯示免疫4個(gè)月后進(jìn)行攻擊的3批疫苗與免疫后3周攻擊的對(duì)應(yīng)批次的疫苗產(chǎn)生的保護(hù)率接近,表明接種該DNA疫苗的仔豬對(duì)抗囊蟲

3、卵攻擊的保護(hù)力能維持4個(gè)月以上,且這種保護(hù)力無明顯變化.另外,就聯(lián)合免疫策略對(duì)保護(hù)水平的影響進(jìn)行了分析:一方面采用DNA疫苗初免,相應(yīng)抗原的蛋白質(zhì)疫苗加強(qiáng)免疫的疫苗接種策略,同時(shí)以僅接種蛋白質(zhì)疫苗的接種組作為對(duì)照觀察組.疫苗接種6周后兩種免疫方式的減蟲率無明顯差異,而疫苗接種20周后聯(lián)合免疫組的減蟲率相對(duì)較高,表明該法能獲得相對(duì)較長(zhǎng)的保護(hù)期.抗體亞型檢測(cè)和淋巴細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)的結(jié)果提示,這種保護(hù)期的差異可能與兩種接種方法產(chǎn)生的免疫應(yīng)答類型的