hB7-1、Sart3雙基因修飾的腫瘤疫苗及其誘導(dǎo)的CTLs對骨肉瘤細(xì)胞的殺傷效應(yīng).pdf

1、華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文hB71、Sart3雙基因修飾的腫瘤疫苗及其誘導(dǎo)的CTLs對骨肉瘤細(xì)胞的殺傷效應(yīng)姓名：黃方敏申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：外科學(xué)（骨外）指導(dǎo)教師：鄭啟新20040401華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院2001級博士學(xué)位論文體hB71Sart3／pEGFPNI。為下一步研究將SART3蛋白作為腫瘤疫苗應(yīng)用于骨肉瘤的生物治療打下基礎(chǔ)?！娟P(guān)鍵詞】抗原；Sart3基因；B7基因：RT—PCR；克隆第二部分：真核表達(dá)載體hB71Sart3

2、tpEGFPN1的表達(dá)【摘要】目的觀察重組質(zhì)粒載體hB71Sart3／pEGFPN1在真核細(xì)胞中的表達(dá)。方法將重組質(zhì)粒載體hB7一lSart3／pEGFP—N1轉(zhuǎn)染人骨肉瘤細(xì)胞株MG一63，利用流式細(xì)胞儀和westernblot檢測hB71和Sart3基因的表達(dá)。結(jié)果流式細(xì)胞儀測定發(fā)現(xiàn)在轉(zhuǎn)染的人骨肉瘤細(xì)胞株表面有明顯的熒光增強(qiáng)，免疫印跡發(fā)現(xiàn)融合蛋白可以與抗B7抗體反應(yīng)，融合蛋白分子量與B7一Sart3一EGFP的預(yù)測分子量相當(dāng)。結(jié)論重組

3、質(zhì)粒載體hB7—1Sart3／pEGFP—N1能夠在真核系統(tǒng)中表達(dá)B7—1分子和Sart3抗原蛋白?！娟P(guān)鍵詞】抗原；Sart3基因；B7基因；表達(dá)第三部分：hB71、Sart3基因介導(dǎo)的的骨肉瘤細(xì)胞的抗原提呈作用【摘要】目的探討B(tài)71、Sart3雙基因修飾的骨肉瘤細(xì)胞作為抗原提呈細(xì)胞，誘導(dǎo)抗腫瘤的細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞(CTL)反應(yīng)的可能性。方法用含人B7一l、Sart3雙基因的重組真核表達(dá)載體修飾骨肉瘤細(xì)胞MG63，體外刺激異體淋巴細(xì)胞，誘

4、導(dǎo)細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞反應(yīng)。結(jié)果成功地誘導(dǎo)了細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞反應(yīng)，獲得的CTL在體外對骨肉瘤細(xì)胞有顯著的細(xì)胞毒活性，其培養(yǎng)上清中IFN—Y分泌水平增高。結(jié)論經(jīng)B7—1、Sart3雙基因修飾的骨肉瘤細(xì)胞，可以作為有效的抗原提呈細(xì)胞，誘導(dǎo)抗骨肉瘤的細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞反應(yīng)。【關(guān)鍵詞】抗原提呈細(xì)胞；Sart3基因：B7基因；細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞第四部分：基因修飾的腫瘤疫苗誘導(dǎo)的CTLs對耐藥腫瘤細(xì)胞的殺傷作用【摘要】目的探討hB7—1、Sart3雙基因修