抗STAT5抗體的制備及其在人乳腺癌發(fā)生發(fā)展中作用的研究.pdf

1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文抗STAT5抗體的制備及其在人乳腺癌發(fā)生發(fā)展中作用的研究姓名：陳晶申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)指導(dǎo)教師：?jiǎn)伪６?馬洪20050301中 文 摘 要多克隆抗體，并用免疫印跡法檢測(cè)抗體的純度和特異性。3 人乳腺組織中 S T A T 5蛋白 表達(dá)定位的觀察:隨機(jī)選取河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院外科2 0 0 3 年9 月一2 0 0 4 年4 月乳腺癌手術(shù)患者標(biāo)本7 5 例( 術(shù)前均經(jīng)針吸細(xì)胞學(xué)或術(shù)中 冰凍病理證實(shí)

2、為乳腺癌) ， 以2 0 例正?；蛄茧U(xiǎn) 乳腺組織標(biāo)本作為對(duì)照，制作石蠟切片。 患者均為女性， 年齡 3 0- 7 4 歲， 中 位年齡4 5歲。采用免疫組化 S - P 法用所制備的抗 S T A T 5 多克隆抗體檢測(cè) S T A T 5 在乳腺組織中的定位情況，比較其差異性。4 .人乳腺組織中 S T A T 5 蛋白表達(dá)水平和 S T A T 5 基因表達(dá)水 平的 測(cè)定: 隨 機(jī)選取河北醫(yī) 科大學(xué) 第四 醫(yī)院 2 0 0 3 年

3、1 2月一2 0 0 4 年5 月住院手術(shù)的女性患者4 4 名( 術(shù)前均經(jīng)針吸細(xì)胞學(xué)或術(shù)中冰凍病理證實(shí)為乳腺癌) ， 均為女性， 年齡 3 3 ^ - 7 5歲， 中位年齡 4 8 歲， 病變標(biāo)本離體后迅速取癌組織及距其>5 c m正常乳腺組織標(biāo)本各兩份， 每份 2 0 毫克， 凍存于液氮中。用免疫印跡法和 R T P C R法分別檢測(cè)乳腺癌組織及正常乳腺組織中S T A T 5 蛋白 和S T A T 5 基因的表達(dá)水平， 比

4、 較其差異性。5 .蛋白 酪氨酸激酶 O A K ) 抑制劑 I 對(duì)人乳腺癌細(xì)胞增殖、凋亡和 S T A T 5 , B c l - x l 蛋白 表達(dá)的影響: 采用 M T T比色法 研究了J A K抑 制劑I 分別 在 2 5 , 5 0 , 7 5 , 1 0 0 g M 四 個(gè)濃度對(duì)人乳腺癌細(xì)胞株 M C F - 7 和 M D A - M B - 2 3 1 增殖反應(yīng)的抑制作用; 應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)測(cè)定和觀察了J A K

5、抑制劑 I 在上述四 個(gè)濃度作用 7 2 h 后誘導(dǎo)M C F - 7 和 M D A - M B - 2 3 1 的細(xì)胞周期變化及細(xì)胞凋亡的作用， 并用免疫印 跡法觀察M C F - 7 細(xì)胞被 J A K抑制劑 I 作用2 4 h , 4 8 h 和7 2 h 后對(duì)S T A T 5 和 B c l - x l蛋白 表達(dá)的 影響。6 .統(tǒng)計(jì)學(xué)方法: 應(yīng)用 S P S S 1 0 . 0 軟件， 采用 t 檢驗(yàn)、 卡方一 - ~ .