宮內(nèi)感染致胎鼠腦損傷發(fā)病機(jī)理的研究及地塞米松的保護(hù)作用.pdf

1、在宮內(nèi)感染時(shí),微生物產(chǎn)物可以刺激胎兒血液循環(huán)中的單核細(xì)胞產(chǎn)生IL-1β和TNF,增加血腦屏障的通透性,微生物產(chǎn)物(如內(nèi)毒素)和細(xì)胞因子可透過血腦屏障進(jìn)入胎兒的中樞神經(jīng)系統(tǒng).中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)小膠質(zhì)細(xì)胞遭受內(nèi)毒素(LPS)刺激時(shí)活化可產(chǎn)生炎癥細(xì)胞因子如(TNF-α、IL-1、IL-6).TNF-α、IL-1β、IL-6是炎癥早期的細(xì)胞因子,可通過誘導(dǎo)其它炎癥細(xì)胞因子和細(xì)胞毒介質(zhì)促進(jìn)白細(xì)胞聚集、粘附分子表達(dá)、影響膠質(zhì)細(xì)胞的表達(dá)引起OL的損傷而參

2、與新生兒中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷.LP S可通過與小膠質(zhì)細(xì)胞表面的TLRs結(jié)合激活免疫系統(tǒng),LPS與CD14結(jié)合可活化TLR4,TLR4可激發(fā)細(xì)胞內(nèi)的級(jí)聯(lián)反應(yīng)而導(dǎo)致NF-kB活化,并產(chǎn)生炎癥細(xì)胞因子.體外研究證實(shí):炎癥細(xì)胞因子TNF-α可通過誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞或誘導(dǎo)OL表面的死亡受體Fas或TNFR-1對(duì)培養(yǎng)的OL產(chǎn)生直接或間接損害作用.可見:WMD發(fā)病機(jī)制中TNF-α介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)是重要原因之一.由于地塞米松具有較強(qiáng)的抗炎特性,該研究采用地塞米松作

3、為干預(yù)因素.宮內(nèi)感染是早產(chǎn)兒WMD的主要病因之一,目前可以通過產(chǎn)前注射細(xì)菌(如大腸桿菌)、病毒、細(xì)菌產(chǎn)物(如LPS)復(fù)制宮內(nèi)感染的動(dòng)物模型誘導(dǎo)WMD.革蘭氏陰性菌產(chǎn)物脂多糖(LPS)是制備宮內(nèi)感染的動(dòng)物模型中最常使用的處理因素.本研究參考Cai等的動(dòng)物模型,采用給予孕18天孕鼠腹腔注射LPS制備宮內(nèi)感染的動(dòng)物模型.用LPS處理妊娠大鼠,然后從形態(tài)學(xué)、分子生物學(xué)等方面觀察LPS對(duì)胎鼠腦組織中TNF-αmRNA及其蛋白表達(dá)的影響,觀察宮內(nèi)感

4、染對(duì)胎鼠腦細(xì)胞凋亡、新生鼠的髓鞘發(fā)育的影響,探討地塞米松是否能阻斷TNF-α表達(dá),對(duì)WMD是否具有保護(hù)作用.結(jié)論1.給孕鼠腹腔注射不同劑量LPS,胎盤出現(xiàn)不同程度病理改變,劑量越大,炎癥改變?cè)矫黠@,TNF-α蛋白含量越多,胎鼠死亡越多,提示細(xì)胞因子在胎鼠宮內(nèi)感染及胎鼠損傷的過程中起著炎癥介導(dǎo)作用.LPS可刺激胎鼠腦組織TNF-αmRNA的轉(zhuǎn)錄,進(jìn)而導(dǎo)致腦組織內(nèi)TNF-α蛋白水平升高;LPS可致胎鼠腦凋亡細(xì)胞數(shù)增多,提示TNF-α可能是L

5、PS致胎鼠腦損傷的關(guān)鍵的細(xì)胞因子;地塞米松可阻斷胎腦TNF-α的表達(dá),減輕腦細(xì)胞凋亡的改變,提示地塞米松對(duì)宮內(nèi)感染致腦損傷具有保護(hù)作用.2.新生鼠腦MBP形成發(fā)生在生后一周左右,以后逐漸增多,21日齡時(shí)的MBP表達(dá)最多,提示新生鼠髓鞘發(fā)育是在生后的一段時(shí)間逐漸形成的.LPS誘導(dǎo)宮內(nèi)感染時(shí),相同日齡的LPS組新生鼠腦組織MBP表達(dá)較鹽水對(duì)照組明顯減少,提示宮內(nèi)感染可對(duì)新生鼠髓鞘發(fā)育產(chǎn)生重要影晌,導(dǎo)致新生鼠腦損傷.綜上所述,本研究證實(shí)了LP