小檗胺對肝癌細胞的作用及其機制的初步研究.pdf

1、目的:研究小檗胺對人肝癌SMMC-7721細胞的增殖及凋亡作用，探索其可能機制，為臨床治療提供理論依據(jù)。
　　方法:經不同濃度的小檗胺處理體外培養(yǎng)的肝癌SMMC-7721細胞，采用MTT法檢測細胞增殖的變化;采用相差拍照法檢測細胞的形態(tài)學變化;采用PI染色法檢測腫瘤細胞周期分布的變化;采用RT-PCR和western-blot法檢測腫瘤細胞中cyclin B1、cyclin D1、p21和p27的表達水平;采用Annexin/PI

2、和DAPI染色法檢測腫瘤細胞凋亡水平的變化;采用細胞免疫熒光法檢測細胞色素C的變化;采用RT-PCR和western-blot法檢測腫瘤細胞中bax、bcl-2、p53和survivin的表達水平。
　　結果:與對照組比較，不同濃度的小檗胺均可明顯抑制人肝癌SMMC-7721細胞增殖。PI染色結果顯示，小檗胺可有效誘導肝癌細胞周期阻滯于G0/G1期(P＜0.05，P＜0.01)。RT-PCR和western-blot結果均顯示，應

3、用小檗胺處理腫瘤細胞后，p21和p27的表達明顯升高，而cyclin B1和cyclin D1的表達水平明顯下降(P＜0.05，P＜0.01)。此外，與對照組比較，不同濃度的小檗胺均可明顯誘導人肝癌細胞凋亡，并且促使細胞色素C從細胞核轉位到胞漿。RT-PCR和western-blot結果均顯示，應用10-40μ M小檗胺處理腫瘤細胞后，bax和p53的表達明顯升高，而bcl-2和survivin的表達水平明顯下降，bcl-2/bax比例

4、顯著降低，且隨著藥物濃度的增加其作用更為明顯(P＜0.05，P＜0.01)。
　　結論:小檗胺能明顯地抑制人肝癌SMMC-7721細胞增殖并誘導細胞凋亡。一方面，小檗胺能抑制人肝癌SMMC-7721細胞增殖，并使其細胞周期阻滯于G0/G1期，其機制可能與其上調p21和p27的表達和下調cyclin B1和Cyclin D1的表達有關。另一方面，小檗胺能誘導人肝癌SMMC-7721細胞凋亡，其機制可能與上調bax和p53、下調bcl