小檗胺抗白血病作用及其機(jī)制的體外及體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、浙江大學(xué)博士學(xué)位論文小檗胺抗白血病作用及其機(jī)制的體外及體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究姓名：吳東申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專(zhuān)業(yè)：內(nèi)科學(xué)（血液病學(xué)）指導(dǎo)教師：林茂芳2003.4.1浙江犬掌博士辯位論文捆’善48、72h對(duì)K562細(xì)胞的抑制率分別為2663％357％，6184％474％，7532％195％；對(duì)Jurkat細(xì)胞的抑制率分別為2677％530％，4448％4805％，7031％263％。HL60、NB4細(xì)胞對(duì)小檗胺同樣敏感，40、80、16。Opg／mlB

2、ER作用72h，對(duì)HL60細(xì)胞的抑制搴分別為4367％194％、S6，77％445％、7926％2。28％：對(duì)NB4細(xì)胞的搦制攀則分別為4607％3。72％、8521％0。78％、92。26％1。73％(與對(duì)照組超毖，P馕均O05)。上述4辨纓腿的72h半數(shù)靜鍘濃度島分剮為5227l。307pg／ml、3893l。207tg／ml、59261031pg／ml及37691319弘g／ml。經(jīng)，j、檗胺霹正常骨髓單個(gè)核細(xì)穩(wěn)的抑稍俸蠲掇，j、

3、，8O嘲／mlBER作用72h的抑制率小于1o筠，Ic軸值為103650士10，257Dg／ml，約是上述白血病細(xì)胞株的175275倍。上述結(jié)果提示，小檠胺具有較廣譜的抗白血病細(xì)胞的作用，白血病細(xì)胞對(duì)小檗胺的敏感性明最地高予正常骨髓單個(gè)核細(xì)胞。本研究在光學(xué)顯微鏡及透視電鏡下均觀察到經(jīng)小繁胺作用后的細(xì)胞具有典型的凋亡形態(tài)學(xué)改變；DNA電泳顯示典挺的“DNA梯形帶”；經(jīng)漉式細(xì)胞儀檢測(cè)到明確的凋亡峰。與闋濃度點(diǎn)對(duì)照組相比，8。Olag／mlB

4、ER處理72hJ薹，K562細(xì)胞凋亡棗明顯地增加6177％435％啦050％014％，PO。01)，露經(jīng)譽(yù)同濃度BER俸翳24h壓，隧篝藥物濃度增加，烈亡攀也擺皮挺離，泰2Opg／mt維豹427％058％上舞至8O_tglml綴煞29，20％士382％。麓樣，在奪檗藏簸囂J薔的Jurkat及NB4緇戇中，氌梭測(cè)飄明確的凋亡峰。經(jīng)8Opg／mlBER楚毽72h借，凋亡率分別商這6480％587％及6753％4_379％，與同濃度點(diǎn)對(duì)照緞相

5、比均有駐著性蒺異(PO01)。以上結(jié)果襲明，小檗胺除對(duì)已報(bào)道豹HL60細(xì)胞外，還能顯著地誘導(dǎo)其它類(lèi)型的白血病細(xì)胞凋亡(如K562、Jurkat、NB4細(xì)胞)，并呈明囂的濃度一時(shí)閫依賴(lài)關(guān)系。本研究通過(guò)RTPCR方法檢測(cè)Ks62、Jurkat細(xì)胞bax、bcl2、survivin及bcr／abl等凋亡楣關(guān)基因表達(dá)，采用Westernblotting方法檢測(cè)如s2綱黢BCR／ABL融合爨鑫矮P。農(nóng)平。結(jié)果纛承，小紫騷作爝予Jurkat緞戇籍，