As-,4-S-,4-誘導腫瘤細胞凋亡及其機制的研究.pdf

1、上海第二醫(yī)科大學博士學位論文AsS誘導腫瘤細胞凋亡及其機制的研究姓名：葉啟東申請學位級別：博士專業(yè)：兒科血液腫瘤學指導教師：顧龍君20050401Ass誘導腫瘤細胞凋亡及其機制研究中文詳細摘要目的中藥治療腫瘤已有兩千年歷史，某些抗腫瘤作用并不遜于西藥化療。但中藥組份復雜，如何有效利用其中抗腫瘤組份，并提供科學研究數(shù)掘是充分發(fā)展祖國中醫(yī)藥學的一個重要方面，而中藥組份的抗腫瘤研究要實現(xiàn)現(xiàn)代化，走向國際化，除了要進行大規(guī)模的隨機多中心臨床研究

2、以外，還要有深入的基礎研究作為后盾進行配合。隨著對As203和維甲酸等研究的深入，并成功應用于白血病的治療，近年，中藥組份治療白血病的基礎研究已成為一個研究熱點。研究發(fā)現(xiàn)，雄黃的有效組份As4S4在治療濃度下即能有效誘導性早幼粒細胞白血病(APL)細胞株NB4細胞的凋亡；在臨床上，陸道培教授用As4S4治療APL亦已取得令人滿意的療效。本研究選取部分腫瘤細胞株體外培養(yǎng)，通過As4S。處理來明確其用于治療其它腫瘤的可能性，并進一步探索其抗

3、腫瘤細胞作用的可能機制，材料和方法本研究以不同濃度的As。s作用于ALK的ALCL腫瘤細胞系(Karpas299)，人慢性粒細胞白血病細胞系(K562)和人急性粒細胞白m病M2細胞系(HL一60)不同時間。應用瑞氏染色分析細胞形態(tài)學變化，MTS方法檢測腫瘤細胞增殖的影響，臺盼蘭染色觀察腫瘤細胞活力的影nm利用流式細胞儀檢測腫瘤細胞周期、細胞凋亡的變化，實時熒光定量PCR檢測BCRABL和NPMALK融合基因以及凋亡途徑中bcl—XhBa

4、x和Bad基因的表達變化，WesternBlot分析BCR—ABL和NPM—ALK融合蛋白和信號途徑pAkt蛋白表達的變化，從中了解Ass對腫瘤細胞的作用及機制。結果As。s。對腫瘤細胞株生長的抑制臺盼蘭和MTS實驗顯示，在05umol／L濃度下孵育24d時，AsS。能明顯抑制腫瘤細胞的生長。As—S。對K562、Karpas299和HL一60細胞的活力均有明顯抑制作用。As—s。對腫瘤細胞的抑制作用星現(xiàn)時問和劑量依賴性關系。當As。S