胸導(dǎo)管引流及丹參多酚酸對(duì)重癥急性胰腺炎腎損傷影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:重癥急性胰腺炎(Severe Acute Pancreatitis，SAP)起病急驟，病情發(fā)展迅速，病死率高，患者多死于繼發(fā)感染和多臟器功能衰竭。其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，具體的發(fā)病機(jī)制目前尚不完全清楚。腎臟是重癥急性胰腺炎時(shí)最常受累的胰外器官之一，SAP并發(fā)急性腎損害(Acute Kidney Injury，AKI)比例高達(dá)53.9％，如進(jìn)一步發(fā)展為急性腎衰竭則病死率高達(dá)50％。急性腎損害已成為SAP重要死亡危險(xiǎn)因素之一。其發(fā)病機(jī)制可能與

2、腎臟缺血缺氧、細(xì)菌內(nèi)毒素?fù)p傷、細(xì)胞因子及炎癥介質(zhì)對(duì)腎實(shí)質(zhì)的直接損傷，以及腎素-血管緊張素系統(tǒng)的激活和腎臟的微循環(huán)障礙等血流動(dòng)力學(xué)變化有關(guān)。因此，進(jìn)一步研究其發(fā)病機(jī)制并尋求有效的防治措施，具有很重要的臨床價(jià)值。目前，胸導(dǎo)管淋巴液引流在中重度燒傷、感染中毒性休克及細(xì)菌內(nèi)毒素二重打擊中的作用得到廣泛研究，認(rèn)為其可以作為血液中細(xì)菌、內(nèi)毒素移位的途徑。丹參多酚酸具有抗氧化應(yīng)激、改善微循環(huán)、改善細(xì)胞能量代謝等多種藥理作用，目前多應(yīng)用于治療輕中度腦梗

3、死恢復(fù)期的血管疏通等缺血性心腦血管疾病。
　　本實(shí)驗(yàn)采用經(jīng)胰膽管逆行緩慢注射5％?；悄懰徕c造成大鼠SAP模型，并與行頸部胸導(dǎo)管穿刺引流淋巴液及靜脈注射丹參多酚酸之后對(duì)比檢測(cè)大鼠血清淀粉酶(AMY)、肌酐(CR)、尿素氮(BUN)等指標(biāo)的變化，胸導(dǎo)管引流淋巴液中內(nèi)毒素含量的變化。旨在揭示SAP并發(fā)腎損傷的機(jī)制，并發(fā)現(xiàn)有效的干預(yù)措施，為今后指導(dǎo)臨床治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:
　　健康SD雄性大鼠144只，體重330±3

4、0g，隨機(jī)分成18組，每組8只，包括:頸部假手術(shù)組+腹部假手術(shù)組（J組）2、6、12小時(shí)(J2h、6h、12h)組;頸部胸導(dǎo)管引流+腹部假手術(shù)組(Sham組)2、6、12小時(shí)(Sham2h、6h、12h)組;頸部假手術(shù)組+SAP組(SAP組)2、6、12小時(shí)(SAP2h、6h、12h)組;頸部胸導(dǎo)管引流+SAP組（L組）2、6、12小時(shí)(LD2h、6h、12h)組;SAP+丹參多酚酸給藥組（D組）2、6、12小時(shí)(D2h、6h、12h)

5、組;頸部胸導(dǎo)管引流+SAP+丹參多酚酸給藥組（LD組）2、6、12小時(shí)(LD2h、6h、12h)組;實(shí)驗(yàn)采用以5％牛磺酸膽酸鈉溶液經(jīng)胰膽管逆行緩慢注射誘導(dǎo)制備SAP模型，并行尾靜脈穿刺進(jìn)行補(bǔ)液，各組按要求行頸部胸導(dǎo)管穿刺置管引流術(shù)及經(jīng)尾靜脈給予緩慢注射丹參多酚酸。按規(guī)定時(shí)間點(diǎn)于術(shù)后2、6、12 h進(jìn)行胰腺、腎臟組織大體觀察，測(cè)量腹水量，留取血清、血漿樣本及組織標(biāo)本，胸導(dǎo)管引流組按每小時(shí)留取淋巴液樣本。肉眼觀察組織大體形態(tài)變化，光鏡下測(cè)定

6、胰腺及腎臟的病理評(píng)分。檢測(cè)血清淀粉酶、肌酐、尿素氮，血清過(guò)氧化氫酶(CAT)和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)及胸導(dǎo)管引流淋巴液中內(nèi)毒素的含量。
　　結(jié)果:
　　1、J與Sham組相比較腹水量及顏色、胰腺及腎臟病理變化、血清淀粉酶(AMY)、肌酐(CR)、尿素氮(BUN)，血漿、胰腺及腎組織勻漿中過(guò)氧化氫酶(CAT)和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)水平及胸導(dǎo)管引流淋巴液中內(nèi)毒素的含量無(wú)明顯差異;
　　2、SAP組

7、大鼠與J、Sham組相比，有明顯大量的腹水，顏色暗紅，且隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，腹水量增大，顏色加深;胰腺大體所見(jiàn)有廣泛明顯充血水腫，片狀出血和黑色壞死，6h組及12h組存在散在皂化斑，胰腺病理評(píng)分明顯增高(P＜0.01)。腎臟SAP12h組表面暗紅、有腫脹。血清淀粉酶、肌酐、尿素氮含量明顯升高(P＜0.01)，且隨時(shí)間延長(zhǎng)進(jìn)一步升高;血清過(guò)氧化氫酶(CAT)和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)水平明顯降低(P＜0.01)。
　　3、D組

8、、L組、LD組分別與J、Sham組相比，腹水量大、顏色暗紅，胰腺病理評(píng)分明顯增高(P＜0.01)，腎臟病理?yè)p傷明顯加重，血清AMY、肌酐(CR)、尿素氮(BUN)及胸導(dǎo)管引流淋巴液中內(nèi)毒素的含量明顯升高（P＜0.05，或P＜0.01），且隨時(shí)間延長(zhǎng)進(jìn)一步升高;血清過(guò)氧化氫酶(CAT)和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)水平明顯降低(P＜0.01)。
　　4、L組與SAP組比較，腹水量明顯減少(P＜0.01)，胰腺病理評(píng)分明顯降低(

9、P＜0.01)，腎臟病理?yè)p傷減輕，血清AMY、肌酐(CR)、尿素氮(BUN)含量明顯降低（P＜0.05，或P＜0.01），且隨時(shí)間延長(zhǎng)而降低更加明顯(P＜0.05，或P＜0.01);血清過(guò)氧化氫酶(CAT)和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)水平明顯降低(P＜0.01)。
　　5、D組與SAP組比較，腹水量明顯減少(P＜0.01)，胰腺病理評(píng)分明顯降低(P＜0.01)，腎臟病理?yè)p傷減輕，血清AMY、肌酐(CR)、尿素氮(BUN)濃

10、度明顯降低（P＜0.05，或P＜0.01），且隨時(shí)間延長(zhǎng)而明顯降低;血清過(guò)氧化氫酶(CAT)和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)水平明顯降低(P＜0.01);
　　6、LD組與SAP組比較，腹水量明顯減少(P＜0.01)，胰腺病理評(píng)分明顯降低(P＜0.01)，腎臟病理?yè)p傷顯著減輕，血清AMY、肌酐(CR)、尿素氮(BUN)及胸導(dǎo)管引流淋巴液中內(nèi)毒素的含量顯著降低(P＜0.05，或P＜0.01)，且隨時(shí)間延長(zhǎng)而降低更明顯;血清過(guò)氧化

11、氫酶(CAT)和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)水平明顯降低(P＜0.01)。
　　7、LD組與L組、D組各相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)組比較，腹水量明顯減少(P＜0.01)，胰腺充血、水腫、出血及壞死情況有所減輕;病理評(píng)分降低(P＜0.01)，腎臟腫脹情況減輕，鏡下病理?yè)p傷明顯減輕。血清AMY、肌酐(CR)、尿素氮(BUN)，明顯降低(P＜0.05或P＜0.01)，血清過(guò)氧化氫酶(CAT)和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)水平明顯降低(P＜0

12、.01)。
　　結(jié)論:
　　1.SAP時(shí)腎臟出現(xiàn)腎實(shí)質(zhì)廣泛出血，腎小管上皮細(xì)胞變性壞死，腎間質(zhì)淤血、炎細(xì)胞浸潤(rùn)，腎小管狹窄、堵塞等病理改變， AMY、CR、BUN水平明顯升高，血漿、腎組織勻漿中CAT和GSH-PX水平明顯降低，說(shuō)明SAP時(shí)引起了腎損傷性變化，腎功能受到影響。
　　2.SAP并發(fā)腎損傷時(shí)，胸導(dǎo)管淋巴液中的內(nèi)毒素濃度含量較正常有明顯升高，血液中內(nèi)毒素濃度水平也明顯升高，提示其與SAP并發(fā)腎損傷密切相關(guān)。<

13、br>　　3.在SAP伴AKI時(shí)，血清、淋巴液、胰腺及腎組織勻漿中CAT、GSH-PX缺乏，說(shuō)明機(jī)體抗氧化能力下降。
　　4.行胸導(dǎo)管淋巴液引流后，腎臟病理?yè)p傷改變較SAP組明顯減輕，AMY、CR、BUN水平明顯降低，CAT和GSH-PX水平明顯升高，血液中內(nèi)毒素的含量明顯降低，說(shuō)明胸導(dǎo)管引流對(duì)腎臟起到保護(hù)作用。
　　5.應(yīng)用丹參多酚酸能通過(guò)改善全身微循環(huán)、清除氧自由基等作用減輕SAP時(shí)腎的損害程度。
　　6.胸導(dǎo)管引