胸導(dǎo)管引流及丹參多酚酸對重癥急性胰腺炎并發(fā)腸屏障損傷影響的實驗研究.pdf

1、目的:急性重癥胰腺炎(Severe Acute Pancreatitis，SAP)是一種外科常見的急腹癥，具有病情兇險、并發(fā)癥多、治療困難、死亡率高等特點。腸道是機體應(yīng)激中心器官之一，腸屏障功能的完整性和SAP病情嚴重程度密切相關(guān)。發(fā)生SAP時，缺血再灌注、微循環(huán)障礙、炎癥反應(yīng)、細胞因子過度生成、腸道動力紊亂、腸黏膜上皮細胞過度凋亡、腸道菌群失調(diào)、生長因子缺乏和腸黏膜上皮細胞過度凋亡等原因?qū)е履c屏障功能障礙(Intestine barr

2、ier functional disturbance，IBFD)。而腸屏障損傷，再加上腸動力改變和免疫抑制等因素的聯(lián)合作用致使腸源性細菌及內(nèi)毒素易位，后者又與胰腺及胰腺周圍壞死組織繼發(fā)感染、全身膿毒癥以及多器官功能障礙綜合征（Multiple organ dysfunction syndrome，MODS）的發(fā)生密切相關(guān)。因此，IBFD被稱為SAP發(fā)生MODS的“發(fā)動機”，而采用針對性措施阻止SAP時IBFD的發(fā)生、防治腸屏障損害時包括

3、腸道內(nèi)毒素及細菌在內(nèi)的腸源性有害物質(zhì)的移位以及改善胰腺、腸道等臟器微循環(huán)障礙對阻止SAP發(fā)展，改善患者的預(yù)后顯得至關(guān)重要。本研究一部分大鼠建立SAP動物模型并給予丹參多酚酸進行干預(yù)，另一部分大鼠建立胸導(dǎo)管引流動物模型并在此基礎(chǔ)上建立SAP模型。探討頸部胸導(dǎo)管引流及丹參多酚酸對SAP大鼠保護作用及其作用機制，為臨床治療SAP伴腸屏障損害提供新的思路和實驗依據(jù)。
　　方法:
　　144只健康成年雄性SD大鼠（清潔級），體重300

4、-380g，隨機分成:假手術(shù)組（J組）、頸部胸導(dǎo)管引流對照組（Sham組）、SAP組（S組）、SAP頸部胸導(dǎo)管引流干預(yù)組（L組）、SAP丹參多酚酸干預(yù)組（D組）、SAP頸部胸導(dǎo)管引流+丹參多酚酸干預(yù)組(LD組)，每組再按2、6、12小時3個時段隨機分為3個小組，每小組8只大鼠，J、Sham組自操作完成后開始計時，其余四組從SAP制模完成后開始計時。J組:切開頸部找到左頸干與胸導(dǎo)管結(jié)合部即可逐層關(guān)閉切口+開腹后僅翻動胰腺關(guān)腹;Sham組給

5、予:頸部胸導(dǎo)管引流+開腹后僅翻動胰腺關(guān)腹;SAP組:逆行胰膽管注射5％?；悄懰徕c（0.11ml/100g體重），誘導(dǎo)SAP模型;L組:胸導(dǎo)管引流成功+SAP大鼠模型;D組:SAP制模成功后立即給予丹參多酚酸;LD:胸導(dǎo)管引流成功及SAP制模之后立即給予丹參多酚酸。各小組分別按照上述時段再次剖腹，肉眼觀察腹水顏色、胰腺大體改變，并記錄腹水的量。采集腹水、血液標本，切取胰腺、末端回腸組織標本，胸導(dǎo)管引流干預(yù)各組按每小時留取淋巴液。應(yīng)用生化法

6、測定血清、腹水、淋巴液淀粉酶(AMY)水平;紫外分光法測定血清、淋巴液、小腸及胰腺組織勻漿中過氧化氫酶(CAT)及谷胱甘肽-過氧化物酶(GSH-PX)水平;終點顯色法測定血漿、淋巴液內(nèi)毒素(ET)水平;取胰腺和回腸末端組織標本，HE染色觀察胰腺和回腸組織病理損傷。
　　結(jié)果:
　　1與同時點J組及Sham組相比:SAP組、L組、D組、LD組各時點腹水量、胰腺病理評分、小腸病理評分、血清淀粉酶、腹水淀粉酶、血漿內(nèi)毒素均明顯升高

7、(P＜0.05 or P＜0.01)，血清GSH-PX、CAT、胰腺及小腸組織勻漿GSH-PX、CAT均明顯降低(P＜0.05 or P＜0.01)。
　　2與同時點L、D組相比:SAP組各時點腹水量明顯升高(P＜0.01);SAP組12小時的胰腺及小腸病理評分明顯升高(P＜0.01); SAP組的12h的血清CAT、GSH-PX明顯降低(P＜0.01)，SAP組腸組織勻漿CAT、GSH-PX各時點顯著降低(P＜0.05 or P

8、＜0.01)，SAP組2、12h的胰腺組織勻漿CAT、GSH-PX明顯降低（P＜0.05），SAP組的血清、腹水淀粉酶各時點明顯升高(P＜0.01)，SAP血漿內(nèi)毒素各時點明顯升高（P＜0.05）。
　　3與同時點L組相比:D組對應(yīng)各時點腹水量明顯升高（P＜0.01）;D組對應(yīng)各時點胰腺及小腸病理評分、血清CAT、腸組織勻漿CAT、胰腺組織勻漿CAT、血清GSH-PX、腹水淀粉酶均無明顯差異;D組12h腸組織勻漿GSH-PX無明顯

9、差異;D組對應(yīng)2h、6h腸組織勻漿GSH-PX及各時點胰腺組織勻漿GSH-PX均明顯降低（P＜0.05），D組對應(yīng)各時點血清淀粉酶及6h、12h血漿中內(nèi)毒素濃度明顯升高(P＜0.05 or P＜0.01);L組2h較對應(yīng)D組血漿中內(nèi)毒素濃度明顯升高（P＜0.05）。
　　4與同時點LD組相比:D、L組6h、12h腹水量明顯增多(P＜0.01);D、L組各時點胰腺及小腸病理評分明顯升高(P＜0.01);L、D組各時點血清CAT、GS

10、H-PX及各時點腸組織勻漿GSH-PX顯著降低(P＜0.05 orP＜0.01);L、D組2h腸組織勻漿CAT明顯降低(P＜0.05 or P＜0.01);L、D組各時點胰腺組織勻漿CAT、GSH-PX明顯降低(P＜0.05);D組各時點血清淀粉酶及L組6h、12h血清淀粉酶明顯升高(P＜0.01);D、L組各時點腹水淀粉酶明顯升高(P＜0.01);D、L組各時點血漿內(nèi)毒素明顯升高(P＜0.05)。
　　5 Sham、LD、L組中

11、淋巴液中的淀粉酶、內(nèi)毒素:(1)與Sham組、LD相比，L組各時點淀粉酶濃度明顯增高（P＜0.01）;L組各時點內(nèi)毒素濃度明顯增高(P＜0.05)。(2)與Sham組相比:LD組6h、12h淀粉酶濃度明顯升高(P＜0.01); LD各時點內(nèi)毒素明顯升高（P＜0.05）。
　　結(jié)論:
　　1 SAP早期即可引起小腸粘膜病理損傷性形態(tài)學(xué)變化，說明SAP伴IBFD的模型制作成功，并可導(dǎo)致血漿、淋巴液中內(nèi)毒素水平明顯增高，說明SAP

12、早期即可造成腸粘膜屏障損傷。
　　2與J組和Sham組相比:SAP合并IBFD時胸導(dǎo)管淋巴液、血清中淀粉酶明顯升高，且淋巴液中淀粉酶明顯高于血清中，據(jù)此推斷，淋巴液中淀粉酶可能是血清中淀粉酶重要來源之一。
　　3與J組和Sham組相比:SAP合并IBFD血清、淋巴液、小腸及胰腺組織勻漿中CAT、GSH-PX活性明顯降低，且隨時間延長更加明顯，說明SAP合并IBFD時機體抗氧化能力降低、清除氧自由基能力降低。
　　4頸部

13、胸導(dǎo)管引流可通過減少淋巴液中內(nèi)毒素、AMY吸收入血，從而減輕SAP合并IBFD。
　　5丹參多酚酸可通過降低SAP合并IBFD時血清、血漿、淋巴液中內(nèi)毒素、AMY濃度，從而減輕胰腺及腸粘膜屏障損傷。
　　6胸導(dǎo)管淋巴引流可升高SAP合并IBFD的CAT、GSH-PX的活性，從而減輕氧化應(yīng)激對胰腺及腸粘膜屏障損傷。
　　7丹參多酚酸可升高SAP合并IBFD的CAT、GSH-PX的活性，從而減輕氧化應(yīng)激對胰腺及腸粘膜屏障損