魚膽毒素致腎小管上皮細(xì)胞死亡方式及其藥物干預(yù)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：觀察草魚膽汁及鯉醇硫酸酯鈉致人腎近曲小管上皮細(xì)胞(HK-2)的死亡方式及早期藥物干預(yù)后HK-2細(xì)胞變化情況，為臨床救治魚膽中毒患者，降低病死率提供理論依據(jù)。 方法：首先根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道方法從草魚膽汁中提取鯉醇硫酸酯鈉，通過(guò)體外培養(yǎng)HK-2細(xì)胞系，應(yīng)用MTT法評(píng)價(jià)草魚膽汁和鯉醇硫酸酯鈉對(duì)HK-2細(xì)胞增殖抑制作用，及不同濃度的丹參、水飛薊賓、氨氯地平和ATP對(duì)草魚膽汁和鯉醇硫酸酯鈉中毒的HK-2細(xì)胞的干預(yù)效果；應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)草

2、魚膽汁和鯉醇硫酸酯鈉所致的HK-2細(xì)胞的主要死亡方式。 結(jié)果：(1)HK-2細(xì)胞存活率隨著草魚膽汁和鯉醇硫酸酯鈉濃度的增加和時(shí)間的延長(zhǎng)而降低，且草魚膽汁和鯉醇硫酸酯鈉對(duì)HK-2細(xì)胞的影響無(wú)明顯差異：(2)對(duì)應(yīng)濃度的草魚膽汁(4μl/ml)和鯉醇硫酸酯鈉(266.8μg/ml)染毒HK-2細(xì)胞24h后，細(xì)胞存活率均隨著丹參濃度的增加而顯著增加(P<0.01)，而且兩者無(wú)差異；但在地塞米松、水飛薊賓、氨氯地平和ATP干預(yù)組，細(xì)胞存活

3、率無(wú)明顯增加(P>0.05)；(3)系列濃度的草魚膽汁和鯉醇硫酸酯鈉染毒HK-2細(xì)胞24h后，細(xì)胞凋亡和脹亡均明顯增多，草魚膽汁(2、4μl/ml)和鯉醇硫酸酯鈉(66.7、133.4μg/ml)時(shí)HK-2細(xì)胞主要呈現(xiàn)凋亡樣壞死；而草魚膽汁(8μg/ml)和鯉醇硫酸酯鈉(533.6μg/ml)時(shí)HK-2細(xì)胞主要呈現(xiàn)脹亡樣壞死。 結(jié)論：1.小劑量的草魚膽汁和鯉醇硫酸酯鈉主要導(dǎo)致HK-2細(xì)胞呈現(xiàn)凋亡樣壞死；大劑量的草魚膽汁和鯉醇硫酸