慢性腎衰幼年大鼠腎小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的分子表型及干預(yù)研究.pdf

1、目的:探討5/6腎切除殘腎慢性腎衰幼年大鼠慢性進(jìn)展性腎小管間質(zhì)損傷過程中，轉(zhuǎn)化生長因子—β1(TGF—β1)蛋白的表達(dá)趨勢以及其介導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化(EMT)過程中相關(guān)蛋白成纖維細(xì)胞特異性蛋白-1(FSP-1)、α—平滑肌肌動蛋白(α—SMA)、波形蛋白(vimentin)和E—鈣黏蛋白(E—cadherin)的動態(tài)表達(dá)趨勢，并觀察給予血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑(ACEI)和血管緊張素受體阻斷劑(ARB)干預(yù)治療的影響。 方法

2、:96只3～4周齡幼年雌性SD大鼠，隨機將其分為假手術(shù)組(n=32)、5/6NX未干預(yù)組(n=32)和5/6NX干預(yù)組(n=32)，采用5/6腎切除法制備殘腎漫性腎衰模型，于手術(shù)完成后，經(jīng)測定大鼠腎功能及腎臟病理以評價模型是否成功。5/6NX干預(yù)組于模型成功后給予ACEI+ARB聯(lián)合灌胃。分別于第2、4、8、12周末，每組隨機選8只大鼠，于內(nèi)眥靜脈采血測血清肌酐(SCr)和尿素氮(BUN)；處死動物，取出腎組織，同時處死假手術(shù)組大鼠，取

3、出腎組織；石蠟切片，HE染色觀察腎小管間質(zhì)損害及纖維化程度；免疫組化法檢測腎小管上皮細(xì)胞TGF—β1、E—cadherin、FSP-1、α—SMA和vimentin等各目標(biāo)蛋白質(zhì)分子的表達(dá)。 結(jié)果: (1)HE染色顯示：假手術(shù)組大鼠腎組織無明顯變化；5/6NX未干預(yù)組大鼠隨著實驗時間的延長，腎小管間質(zhì)病變?nèi)遮吤黠@，表現(xiàn)為組織中炎性細(xì)胞(主要為單核細(xì)胞)浸潤，腎小管上皮細(xì)胞腫脹，腎小管塌陷及腎小管間隙加寬，并進(jìn)行性形成纖維

4、化病變；5/6NX干預(yù)組大鼠小管間質(zhì)病變則相對減輕。 (2)免疫組化染色半定量積分值顯示：5/6NX未干預(yù)組和干預(yù)組大鼠腎小管上皮細(xì)胞E—cadherin的表達(dá)隨著實驗時間的延長而逐漸減少，各時間點與假手術(shù)組比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，第8與12周，干預(yù)組蛋白表達(dá)量與未干預(yù)組比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；而FSP-1、vimentin的表達(dá)逐漸增加，均較同期假手術(shù)組有顯著差異(P＜0.05)，除第2周外，各時間

5、點干預(yù)組蛋白表達(dá)量與未干預(yù)組比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；同時，α—SMA的表達(dá)量也逐漸增加，除第2周外，各時間點5/6NX未干預(yù)組和干預(yù)組α—SMA與假手術(shù)組比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，第8與12周干預(yù)組蛋白表達(dá)量與未干預(yù)組比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；TGF—β1的表達(dá)量逐漸增加，除第2周外，各時間點5/6NX未干預(yù)組和干預(yù)組TGF—β1蛋白的表達(dá)量與假手術(shù)組比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，除第2周外