部分代謝綜合征組分對腎小管上皮細(xì)胞影響的實驗研究.pdf

1、本研究觀察了不同濃度葡萄糖、胰島素和尿酸在培養(yǎng)條件下對豬近端腎小管上皮細(xì)胞株(LLC-PK1)細(xì)胞內(nèi)血紅素氧合酶(HO-1)活性，以及胰島素、尿酸對此腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)cAMP水平和Na+、K+、細(xì)胞內(nèi)Ca2+及Na+-K+-ATP酶活性的影響。 研究方法： 1、不同濃度葡萄糖、胰島素和尿酸作用于LLC-PK1細(xì)胞48h后，測定HO-1的活性。 2、不同濃度胰島素和尿酸作用于LLC-PK1細(xì)胞24h后，測定LLC-

2、PK1細(xì)胞內(nèi)cAMP水平、Na+-K+-ATP酶活性的改變以及離子轉(zhuǎn)運情況。 研究結(jié)果： 1、與5mM相比(0.65±0.10μmol/L)，10mM，22mM和33mM(0.68±0.12μmol/L，0.73±0.11μmol/L，0.70±0.10μmol/L)葡萄糖刺激LLC-PK1細(xì)胞48h后，LLC-PK1細(xì)胞的HO-1活性無差異(P值均大于0.05)。 2、與尿酸為0mM相比(0.65±0.12μm

3、ol/L)、0.1mM、0.2mM和0.4mM尿酸刺激48h后，LLC-PK1的HO-1活性均顯著增加(0.93±0.29μmol/1.65±0.49μmol/L,2.53±0.73μmol/L)；且尿酸濃度和HO-1活性增加呈劑量相關(guān)關(guān)系(r=0.849，P＜0.01)。 3、濃度為10-9M，10-8M，10-7M的胰島素分別刺激LLC-PK1細(xì)胞48h后與0M相比，其HO-1活性無改變(0.65±0.12μmol/L比0.

4、66±0.12μmol/L，0.67±0.13μmol/L.0.66±0.11μmol/L，P值均大于0.05)。 4、不同濃度尿酸作用24h后LLC-PK1細(xì)胞cAMP、細(xì)胞內(nèi)Ca2+、Na+濃度隨著尿酸濃度的增加而增加，與0mM相比差異顯著(P＜0.05)；而Na+-K+-ATP酶活性、K+則與前者剛好相反，它們隨著尿酸的濃度增加而降低，與0mM比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)。 5、不同濃度胰島素孵育LLC-PK1

5、細(xì)胞24h后cAMP水平、Na+-K+-ATP酶活性及細(xì)胞Ca2+、Na+、K+濃度發(fā)生改變，結(jié)果顯示細(xì)胞Ca2+、Na+濃度隨著胰島素濃度的增加而增加，與對照相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；而cAMP水平、Na+-K+-ATP酶活性、K+則隨著胰島素濃度的增加而降低，與0M比較亦有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)。 研究結(jié)論： 1、一定濃度的尿酸在一定時間范圍使LLC-PK1細(xì)胞HO-1的活性升高，提示尿酸在細(xì)胞水平對

6、腎小管上皮細(xì)胞的氧化應(yīng)激過程產(chǎn)生影響。 2、尿酸在刺激LLC-PK1細(xì)胞24h后，生理濃度及略高于生理濃度的尿酸刺激LLC-PK1細(xì)胞即可引起cAMP水平、細(xì)胞Ca2+、Na+濃度升高，Na+-K+-ATP酶的活性和K+濃度下降，說明尿酸對腎小管上皮細(xì)胞信號系統(tǒng)及離子轉(zhuǎn)運有明顯的影響。 3、隨著胰島素濃度的增加，細(xì)胞Ca2+、Na+的濃度也增加；而cAMP水平、Na+-K+-ATP酶活性、K+則隨著胰島素濃度的增加而降低