約氏瘧原蟲感染小鼠巨噬細(xì)胞活化和效應(yīng)特點(diǎn)的研究.pdf

1、瘧疾是全球關(guān)注、高發(fā)的感染性疾病。Nature最新報(bào)道顯示，截止2002年，世界感染瘧疾的患者人數(shù)達(dá)5.15億，全球受威脅人口達(dá)22億。為此，WHO將艾滋病、結(jié)核和瘧疾列為三類優(yōu)先重點(diǎn)防治的感染性疾病。目前，瘧疾疫苗和抗瘧新藥的研制與開發(fā)是有效控制瘧疾發(fā)生和發(fā)展的重要戰(zhàn)略，其必需的前提基礎(chǔ)有賴于對(duì)宿主保護(hù)性免疫應(yīng)答機(jī)制的進(jìn)一步闡明。 單核-巨噬細(xì)胞在不同方面明顯影響著瘧原蟲的感染過程，它既可作為非特異免疫系統(tǒng)細(xì)胞發(fā)揮非特異性吞噬

2、、殺傷作用，也可參與介導(dǎo)特異性免疫應(yīng)答，發(fā)揮抗原提呈和免疫調(diào)節(jié)的重要作用。大量研究表明，紅內(nèi)期保護(hù)性免疫應(yīng)答的鮮明特點(diǎn)是Th1和Th2型免疫應(yīng)答的有序活化，由CD<,4><'+>Th細(xì)胞和抗體共同參與。感染急性期以IFN-γ為主導(dǎo)的Th1型炎癥性細(xì)胞因子活化巨噬細(xì)胞等免疫效應(yīng)細(xì)胞，遏制瘧原蟲在紅內(nèi)期的爆發(fā)性增殖，有效控制原蟲血癥的迅速上升；隨后應(yīng)答向Th2型過渡，最終以抗體介導(dǎo)的免疫效應(yīng)徹底清除瘧原蟲。前期研究已證實(shí)，活化的單核.巨噬細(xì)

3、胞在約氏瘧原蟲感染早期可能是遏制蟲體血癥水平的關(guān)鍵因素之一。因此，有必要對(duì)巨噬細(xì)胞在整個(gè)感染過程中的活化規(guī)律和效應(yīng)特點(diǎn)進(jìn)行更深一步探討和闡明。 本研究選用P.y 17XL抵抗型DBA/2小鼠為研究對(duì)象，首次全程動(dòng)態(tài)觀察巨噬細(xì)胞表面膜分子、效應(yīng)分子NO含量及其吞噬功能的變化，以期進(jìn)一步闡明在瘧疾感染中巨噬細(xì)胞的活化規(guī)律和效應(yīng)特點(diǎn)，旨在為有效瘧疾疫苗和抗瘧新藥的研制、開發(fā)提供新的理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 實(shí)驗(yàn)材料與方法: 本

4、研究選用P.y 17XL抵抗型DBA/2小鼠為研究對(duì)象。Giemsa薄血膜染色，光學(xué)顯微鏡計(jì)數(shù)紅細(xì)胞感染率；流式細(xì)胞技術(shù)動(dòng)態(tài)檢測DBA/2小鼠在P.y 17XL感染過程中，脾巨噬細(xì)胞數(shù)量，表面膜分子CD36、CD64和MHC Ⅱ的表達(dá)水平；通過Griess反應(yīng)，測定脾巨噬細(xì)胞分泌NO<,2><'->的含量；顯微鏡檢巨噬細(xì)胞的吞噬功能。數(shù)據(jù)以均值±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，數(shù)據(jù)經(jīng)t檢驗(yàn)，P<0.05為差異顯著。 結(jié)論: 在致死

5、型約氏瘧原蟲感染過程中，巨噬細(xì)胞無論在天然免疫和獲得性免疫中均發(fā)揮重要的作用。 1.DBA/2小鼠脾巨噬細(xì)胞的數(shù)量呈現(xiàn)逐步升高的動(dòng)態(tài)變化趨勢； 2．通過MHC Ⅱ類分子表達(dá)，提示巨噬細(xì)胞在IFN-γ刺激作用下發(fā)生了有效活化； 3．巨噬細(xì)胞表達(dá)的清道夫受體CD36在感染早期顯著增加，介導(dǎo)非調(diào)理性吞噬殺傷作用； 4．作為巨噬細(xì)胞表達(dá)的FcγRI(CD64)在感染后期的顯著增加，可能參與抗體介導(dǎo)的調(diào)理性吞噬殺傷