LRIG2基因和蛋白在膀胱腫瘤中的表達(dá)及重組質(zhì)粒載體pCMV-LRIG2轉(zhuǎn)染BIU-87細(xì)胞株的效應(yīng)研究.pdf

1、第一部分
　　 目的：了解LRIG2基因在膀胱腫瘤和正常膀胱組織中的表達(dá)及其與膀胱腫瘤不同分級(jí)、分期之間的關(guān)系
　　 方法：利用半定量RT-PCR技術(shù)檢測(cè)31例膀胱腫瘤組織和16例正常膀胱粘膜組織內(nèi)LRIG2基因mRNA表達(dá)情況，同時(shí)結(jié)合病例的分級(jí)、分期等對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　 結(jié)果：38例腫瘤標(biāo)本中，34例檢測(cè)到LRIG2mRNA的表達(dá)，表達(dá)水平(灰度比值)平均為0.39±0.22(±s)；16例正常粘膜

2、標(biāo)本中均檢測(cè)到LRIG2mRNA的表達(dá)，表達(dá)水平平均為0.54±0.16。兩者相比較P=0.012，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，腫瘤組織內(nèi)LRIG2mRNA的表達(dá)水平顯著低于正常膀胱組織。腫瘤組織中，淺表型腫瘤表達(dá)水平為0.44±0.16，浸潤型為0.21±0.12，兩者相比較P=0.012，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；低級(jí)別腫瘤表達(dá)水平為0.49±0.18，中高級(jí)別為0.33±0.16，兩者相比較P=0.033，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 結(jié)論：LRIG2基因

3、在膀胱腫瘤組織中表達(dá)水平明顯下調(diào)，且與腫瘤的分級(jí)分期相關(guān)，提示其有可能為一種抑癌基因，與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有密切關(guān)系。
　　 第二部分
　　 目的：了解LRIG2蛋白在膀胱腫瘤和正常膀胱組織中的表達(dá)及其與膀胱腫瘤不同分級(jí)、分期之間的關(guān)系
　　 方法：利用Western blot技術(shù)檢測(cè)38例膀胱腫瘤組織和16例正常膀胱粘膜組織內(nèi)LRIG2蛋白A表達(dá)情況，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　 結(jié)果：38例腫瘤標(biāo)本中

4、，33例檢測(cè)到LRIG2蛋白的表達(dá)，表達(dá)水平(灰度比值)平均為0.41±0.15 (±s)；16例正常粘膜標(biāo)本中均檢測(cè)到LRIG2蛋白的表達(dá)，表達(dá)水平平均為0.50±0.08。兩者相比較P=0.038，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,膀胱腫瘤組織內(nèi)LRIG2蛋白的表達(dá)水平顯著低于正常膀胱組織。腫瘤組織中，淺表型腫瘤表達(dá)水平為0.45±0.13，浸潤型為0.27±0.13，兩者相比較P=0.027，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；低級(jí)別腫瘤表達(dá)水平為0.49±0.15，中高

5、級(jí)別為0.35±0.12，兩者相比較P=0.040，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 結(jié)論：LRIG2蛋白在膀胱腫瘤組織中表達(dá)水平明顯下調(diào)，且與腫瘤的分級(jí)分期相關(guān)，提示其有可能是一種具有抑癌功能的蛋白，與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有密切關(guān)系。
　　 第三部分
　　 目的：研究攜帶有LRIG2基因的重組質(zhì)粒載體pCMV-LRIG2對(duì)膀胱癌細(xì)胞株BIU-87生物學(xué)行為的影響。
　　 方法：用脂質(zhì)體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)染技術(shù)，將攜帶有LRI

6、G2基因的重組質(zhì)粒載體pCMV-LRIG2轉(zhuǎn)染至膀胱癌細(xì)胞株BIU-87，用G418篩選出抗性克隆后，Western檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后LRIG2和EGFR蛋白表達(dá)水平變化，MTT法繪制轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞生長曲線，Transwell法檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞侵襲力，同質(zhì)粘附實(shí)驗(yàn)觀察轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞粘附能力。
　　 結(jié)果：轉(zhuǎn)染pCMV-LRIG2組LRIG2蛋白表達(dá)水平顯著高于未轉(zhuǎn)染組和空載體轉(zhuǎn)染組；轉(zhuǎn)染pCMV-LRIG2組細(xì)胞生長速度較未轉(zhuǎn)染組和空載體